PCR・逆転写 PCR・定量 PCR 2025

キット選択ガイド PCR 逆転写PCR 定量PCR 2025 年版 PCR Optimization kit 予め調製された8 種のバッファーとMgCl2、ホットスタート用ポリメラーゼが含まれるキットで、手持ちのプライマーまたはプローブを用いて個々の実験に最適なPCR条件を迅速に決定することができます。一度最適条件が決まれば、試薬のオーダーメイドも可能です。 基礎研究 • エンドポイントPCR と構成品、関連製品(cGMP グレード含む) • 逆転写PCR と構成品、関連製品 • 定量PCR システム • ヒトgDNA の品質チェック 応用研究・産業 • PCR マスターミックス生産のための条件最適化キット、 オーダーメイドと凍結乾燥ビーズ生産サービス(cGMP グレード) • 菌/ ウイルス生死検出用クロスリンカー • レジオネラ菌DNA 検出システム(ISO 準拠) • 阻害物質耐性定量PCR システム • 定量PCR による下水サーベイランス • 価格表 エンドポイントPCR 製品名構成品マスターミックス タイプ 5′-3′ エキソヌクレアーゼ 活性 3′-5′ エキソヌクレアーゼ 活性 増幅産物 サイズ オーバー ハング スタンダードPCR GoTaq® G2 Green Master Mix • GoTaq® G2 Green Master Mix • Nuclease-Free Water 〇〇ー<5 kb 3′ A GoTaq® G2 Colorless Master Mix • GoTaq® G2 Colorless Master Mix • Nuclease-Free Water 〇〇ー<5 kb 3′ A GoTaq® G2 DNA Polymerase • GoTaq® G2 DNA Polymerase • 5X Green GoTaq® Reaction Buffer • 5X Colorless GoTaq® Reaction Buffer ー〇ー<5 kb 3′ A GoTaq® G2 Flexi DNA Polymerase • GoTaq® G2 Flexi DNA Polymerase • 5X Colorless GoTaq® Flexi Buffer • 5X Green GoTaq® Flexi Buffer • MgCl2 ー〇ー<5 kb 3′ A GoTaq® G2 Hot Start Green Master Mix • GoTaq® G2 Hot Start Green Master Mix • Nuclease-Free Water 〇〇ー<5 kb 3′ A GoTaq® G2 Hot Start Colorless Master Mix • GoTaq® G2 Hot Start Colorless Master Mix • Nuclease-Free Water 〇〇ー<5 kb 3′ A GoTaq® G2 Hot Start Polymerase • GoTaq® G2 Hot Start Polymerase • 5X Colorless GoTaq® Flexi Buffer • 5X Green GoTaq® Flexi Buffer • MgCl2 ー〇ー<5 kb 3′ A ロングPCR GoTaq® Long PCR Master Mix • GoTaq® Long PCR Master Mix, 2X • Long PCR Control Primer Pair • Human Genomic DNA • Nuclease-Free Water 〇〇〇<40 kb 3′ A/ blunt ハイフィデリティーPCR Pfu DNA Polymerase • Pfu DNA Polymerase • Pfu 10X Reaction Buffer w/20 mM MgSO4 ー〇〇<10 kb blunt 遺伝子診断薬グレード(cGMP グレード) GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X Colorless GoTaq® Flexi Buffer • 5X Green GoTaq® Flexi Buffer • MgCl2 ー〇ー<5 kb 3′ A GoTaq® MDx Hot Start Polymerase, Glycerol-free • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase, Glycerol-Free • 5X Colorless GoTaq® Flexi Buffer • MgCl2 ー〇ー<5 kb 3′ A GoTaq® MDx Hot Start Taq Polymerase, High Concentration • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X Colorless GoTaq® Flexi Buffer • MgCl2 ー〇ー<5 kb 3′ A GoTaq® MDx DNA Polymerase • GoTaq® MDx Polymerase • 5X Colorless GoTaq® Flexi Buffer • 5X Green GoTaq® Flexi Buffer • MgCl2 ー〇ー<5 kb 3′ A GoTaq® MDx Polymerase, Glycerol-free • GoTaq® MDx DNA Polymerase, Glycerol-Free • 5X Colorless GoTaq® Flexi Buffer • MgCl2 ー〇ー<5 kb 3′ A 2 エンドポイントPCR 構成品& 関連製品 製品名サイズカタログ番号 バッファー 5X Green GoTaq® Reaction Buffer 20 ml M7911 5X Colorless GoTaq® Reaction Buffer 20 ml M7921 5X Green GoTaq® Flexi Reaction Buffer 20 ml M8911 5X Colorless GoTaq® Flexi Reaction Buffer 20 ml M8901 dNTP dNTP Mix, 10 mM 200 μl U1511 1000 μl U1515 dATP, 100 mM 25 μmol U1205 40 μmol U1201 200 μmol U1202 dCTP, 100 mM 25 μmol U1225 40 μmol U1221 200 μmol U1222 dGTP, 100 mM 25 μmol U1215 40 μmol U1211 200 μmol U1212 dTTP, 100 mM 25 μmol U1235 40 μmol U1231 200 μmol U1232 Set of dATP, dCTP, dGTP, dTTP (濃度各100 mM) 各10 μmol U1330 各25 μmol U1420 各40 μmol U1240 各200 μmol U1410 dUTP, 100 mM 40 μmol U1191 Set of dUTP, dCTP, dGTP, dATP (濃度各100 mM) 各10 μmol U1335 各40 μmol U1245 dNTP cGMP グレード PCR Nucleotide Mix, 10 mM 200 μl C1141 1,000 μl C1145 PCR Nucleotide Mix, 25 mM 200 μl U1431 1,000 μl U1432 MgCl2 Magnesium Chloride Solution, 25 mM 1.5 ml A3511 25 ml A3513 cGMP グレード cGMP(Current Good Manufacturing Practice) は、医 薬品、食品、および医療機器の製造・品質管理にお いて現在米国で適用されているガイドラインであり、 その目的は、臨床現場、製薬用途、その他の規制環 境のいずれであっても、これらの製品の一貫性、品質、 安全性を確保することです。 GoTaq® G2 Polymerase GoTaq® DNA Polymerase(従来品)がネイティブの酵素 であるのに対し、GoTaq® G2 DNA Polymerase は第2 世 代の組換え酵素であり、製造プロセスの改善によりロッ ト間でより一貫したパフォーマンスを示します。 ホット スタート ローディングダイ 含有dNTP 含有MgCl2 含有サイズ* カタログ番号 ー〇〇〇 100 回分M7822 1,000 回分M7823 ーー〇〇 100 回分M7832 1,000 回分M7833 ー〇 選択可 別途購入 C1141 〇 100 u M7841 500 u M7845 2,500 u M7848 ー〇 選択可 別途購入 C1141 別包装 100 u M7801 500 u M7805 2,500 u M7806 10,000 u M7808 〇 (抗体) 〇〇〇 100 回分M7422 1,000 回分M7423 〇 (抗体) ー〇〇 100 回分M7432 1,000 回分M7433 〇 (抗体) 〇 選択可 別途購入 C1141 別包装 100 u M7401 500 u M7405 2,500 u M7406 10,000 u M7408 〇 (抗体) ー〇〇100 回分M4021 ーー別途購入 C1141 〇 100 u M7741 500 u M7745 〇 (抗体) 〇 選択可 別途購入 U1511 別包装 100 u D6001 500 u D6005 2,500 u D6006 10,000 u D6008 〇 (抗体) ー別途購入 U1511 別包装500 u D6201 〇 (抗体) ー別途購入 U1511 別包装1,000 u D6101 ー〇 選択可 別途購入 U1511 別包装 100 u D4001 500 u D4005 2,500 u D4006 ーー別途購入 U1511 別包装500 u D4101 * 50 μl 反応系での使用回数で表示。 酵素 100 u は 50 μl 反応系 80 回分に相当。 3 GoTaq® G2 Master Mix GoTaq® G2 DNA Polymerase、dNTP、MgCl2 および反応バッファー のプレミックスで、鋳型とプライマーを入れるだけで使用できま す。最適化された酵素とバッファーの組み合わせにより、標準的 なTaq DNA Polymerase よりも優れたパフォーマンスを示します。 MgCl2 濃度は使用時の1X 反応液では1.5 mM になります。 • 優れた検出感度 • 迅速で能率的なローディングダイ入りマスターミックス • ジェノタイピングで実績多数!(プロトコル有り) DMSO(5%)、Betaine(1 M)の添加が可能です。 12299MA 2.2kb APC model 1.3kb -globin model 360bp -1 antitrypsin model 2.0kb 1.5kb 1.0kb 0.5kb M G C L R T Q N G C L R T Q N G C L R T Q N M Consistent performance with GoTaq® G2 Master Mixes GoTaq® G2 PCR Master Mix は 様々なターゲットで高い収量を示す 3.3 ng のヒトDNA を鋳型とし、GoTaq® G2 DNA Polymerase Green(G)とColorless(C) Master Mix、他社製品(L、R、T、Q、N) を用いてそれぞれのマニュアルに従い増 幅を行った。他社製品の増幅結果にバラ つきが見られるのに対し、GoTaq® G2 DNA Polymerase Master Mix は安定して高い収量 を示した。 GoTaq® G2 Hot Start Master Mix GoTaq® G2 DNA Polymerase, dNTP, MgCl2 および反応バッ ファーのプレミックスで、鋳型とプライマーを入れるだけで 使用できます。GoTaq® G2 DNA Polymeraseには活性をブロッ クする抗体が結合しており、ポリメラーゼ活性は初回の変 性ステップ(94–95℃、2 分間)で修復されます。このホッ トスタートPCR ではポリメラーゼ活性が70℃以下では阻害 されるので、室温でのセットアップが可能です。 • ホットスタートだからプライマーダイマーや非特異的産物を 低減 • 調製後24 時間室温に置いても変わらないパフォーマンス • 反応バッファーは色素を含むものと透明のものから選択可能 DMSO(5%)、Betaine(1 M)の添加が可能です。 クルードサンプルで増幅の実績があります。 GoTaq® G2 Hot Start Master Mix は 優れた感度と頑健な増幅を示す 2.2 kb APC 標的遺伝子を表示量のgDNA(33 ng、3.3 ng and 330 pg[各酵素 左から右])か らGoTaq® G2 Hot Start Green(G)、Colorless(C) Master Mix および他社製品(L1、L2、Q+、T) を用いて増幅した。 11416TB M G M C L1 L2 Q+ T 2kb Robust Yield Superior Sensi vi Lower Sensi vi A. B. 5μl 10μl 15μl 20μl 5μl 10μl 15μl 20μl After Before 1X Green GoTaq® G2 Reaction Buffer を用いたGoTaq® G2 DNA Polymerase 反応の電気泳動 5X Green、5X Colorless Reaction Buffers にはサンプルの比重を増加させる化合物が含まれており、アガロースゲルのウェル内 でサンプルが容易に沈みむためPCR 反応後のサンプルを直接アガロースにアプライし、電気泳動を行うことができます。 Green Reaction Buffer に含まれる2 色の色素成分(青色および黄色)がPCR 反応を阻害することはありません。青色色素は3 ~ 5 kb* のDNA 断片と同じ割合で移動し、黄色の色素は50 bp 以下* のDNA 断片と同じ割合で移動します。Colorless Reaction Buffer は、増幅反応後に色素が影響を与える吸光値や蛍光値の測定などのアプリケーションに推奨されます。 * ゲルの濃度に依存します。 Green Master Mix の場合はあらかじめローディングダイが添加されており、PCR 反応物をそのままア ガロースゲルへアプライできます。 4 逆転写PCR システム・逆転写酵素 製品名構成品(酵素名の後ろの番号は性能チャートに対応) プライマーdNTP MgCl2 RNase 阻害剤サイズカタログ番号 GoScript™ Reverse Transcription System • GoScript™ Reverse Transcriptase ① • GoScript™ 5X Reaction Buffer • MgCl2 • Oligo(dT)15 Primer • Random Primers • PCR Nucleotide Mix • Recombinant RNasin® Ribonuclease Inhibitor • Nuclease-Free Water 〇〇〇〇 50 回分1 A5000 100 回分1 A5001 GoScript™ Reverse Transcription Mix, Oligo(dT) • GoScript™ Enzyme Mix ① • GoScript™ Reaction Buffer, Oligo(dT) • Nuclease-Free Water Reaction Buffer に含有Enzyme Mix に 含有 50 回分1 A2790 100 回分1 A2791 GoScript™ Reverse Transcription Mix, Random Primers • GoScript™ Enzyme Mix ① • GoScript™ Reaction Buffer, Random Primers • Nuclease-Free Water Reaction Buffer に含有Enzyme Mix に 含有 50 回分1 A2800 100 回分1 A2801 GoScript™ Reverse Transcriptase • GoScript™ Reverse Transcriptase ① • GoScript™ 5X Reaction Buffer • MgCl2 別途購入 C1181 or C1101 別途購入 C1141 〇別途購入 N2611 100 回分1 A5003 500 回分1 A5004 M-MLV Reverse Transcriptase • M-MLV Reverse Transcriptase ④ • M-MLV RT 5X Buffer 別途購入 C1181 or C1101 別途購入 U1201 U1221 U1211 U1231 Buffer に 含有 別途購入 N2611 10,000 u 2 M1701 50,000 u 2 M1705 M-MLV Reverse Transcriptase, RNase (H-) • M-MLV Reverse Transcriptase, RNase H Minus ③ • M-MLV RT 5X Buffer 別途購入 C1181 or C1101 別途購入 U1201 U1221 U1211 U1231 Buffer に 含有 別途購入 N2611 10,000 u 3 M5301 M-MLV Reverse Transcriptase RNase (H-) Point Mutant • M-MLV RT, RNase (H–), Point Mutant ② • M-MLV RT 5X Buffer 別途購入 C1181 or C1101 別途購入 U1201 U1221 U1211 U1231 Buffer に 含有 別途購入 N2611 2,500 u 3 M3681 10,000 u 3 M3682 50,000 u 3 M3683 Reverse Transcription System • AMV Reverse Transcriptase (HC) ⑤ • Reverse Transcription 10X Buffer • dNTP Mix • MgCl2 • Oligo(dT)15 Primer • Random Primers • 1.2 kb Kanamycin Positive Control RNA • Recombinant RNasin® Ribonuclease Inhibitor • Nuclease-Free Water 〇〇〇〇100 回分4 A3500 AccessQuick™ RT-PCR System • AMV Reverse Transcriptase ⑤ • AccessQuick™ Master Mix (2X) • Nuclease-Free Water 遺伝子特異的 プライマーを 別途用意 Master Mix に 含有 Maxter Mix に 含有 (MgSO4) ー 20 回分5 A1701 100 回分5 A1702 500 回分5 A1703 Access RT-PCR System • AMV Reverse Transcriptase ⑤ • T DNA Polymerase • AMV/T 5X Reaction Buffer • dNTP Mix • MgSO4 • Upstream Control Primer • Downstream Control Primer • Positive Control RNA with Carrier • Nuclease-Free Water 遺伝子特異的 プライマーを 別途用意 〇〇 (MgSO4) ー 20 回分5 A1260 100 回分5 A1250 500 回分5 A1280 AMV Reverse Transcriptase • AMV Reverse Transcriptase ⑤ • AMV RT 5X Buffer 別途購入 C1181 or C1101 別途購入 U1511 Reaction Buffer に含有 別途購入 N2611 300 u 6 M5101 1,000 u 6 M5108 600 u 6 (高濃度品) M9004 1. 1 回の反応でtotal RNA なら5 μg、poly(A) RNA なら500 ng まで鋳型として使用 2. 200 u で2 μg のRNA からcDNA 合成可能 3. 200 u で1 μg のRNA からcDNA 合成可能 4. 1 回の反応で1 μg のRNA を鋳型として使用 5. 1 回の反応で1 pg-1 μg までのRNA を鋳型として使用 6. 30 u で2 μg のRNA からcDNA 合成可能 逆転写酵素 性能チャート 逆転写酵素① GoScript™ Reverse Transcriptase ② MMLV RT Point Mutant ③ MMLV RT Deletion Mutant ④ MMLV RT ⑤ AMV RT 反応温度42℃(37-55℃) 40-55℃ 37℃(~ 50℃) 37℃(~ 42℃) 42℃(37-58℃) RNase H 活性有り無し無し有り有り 最大合成cDNA 長8.9 kb 7.5 kb 6 kb 5 kb 5 kb 2 次構造への耐性★★★ ★★★ ★ ★ ★ 5 5.8S ACTB B2M HPRT RPL29 TBP1 RNA Input Cq Values 30 35 20 10 15 0.001 0.01 0.1 1 10 100 1,000 10,000 100,000 5 25 40 0 幅広いRNA 量で効率的なcDNA 合成 GoTaq® 2-step RT-qPCR system を用いたヒトtotal RNA 中の6 種の異なるターゲット の定量結果を示す。10 倍ずつ濃度を変えた9 点のtotal RNA インプット(10 ng/ μl to 0.1 fg/ μl)を加えて反応液を調製し、GoScript™ 逆転写反応を行った。各逆転 写反応産物10 μl(100 ng から1 fg インプットRNA に相当)を希釈せず直接 GoTaq® qPCR のサンプルとして使用した。各アッセイは発現レベルが異なる様々な ターゲット、すなわち極めて高レベル発現の5.8S rRNA、高レベル発現のACTB お よびB2M、中間的なHPRT、低レベルのRPL29 およびTBP1 について特異的にな るよう設計した。Total RNA 中におけるそれぞれのターゲット量の違いにともない Cq 値は異なるが、インプット量のlog 変化ごとに≃ 3.3 と理論上に近いサイクル数 変化を示す結果が得られている。 阻害剤に対する耐性 In vitro 転写で合成したRNA をOligo(dT) プライマーを用いて逆転写反応させた(反 応条件は各製品説明書に準拠)。エタノール非存在下および存在下(5%、10% および20%)で逆転写反応を行い、合成したcDNA をGoTaq® qPCR Master Mix を 使用してqPCR 解析した。エタノール非存在下と存在下のサイクル閾値の変化を 転写物レベルの相対変化=(2Cqinhibitor-Cqnone)に変換した。データは3 回の 独立した実験から得られた平均値を表している。 GoScript™ Reverse Transcriptase GoScript™ Reverse TranscriptaseはM-MLVベースで最新のバッ ファー技術を採用したqPCR 用の逆転写酵素です。阻害物質 の存在下でも希少なものから豊富なものまで幅広いレンジの 転写物をcDNA に合成できるようにデザインされています。 • ハイコピーからローコピーまで幅広いmRNA を転写 • 残存エタノールなどの阻害物質に耐性 • 二次構造をもつ短鎖または長鎖RNA からでも合成 市販キットA 市販キットB 市販キットC 市販キットD 逆転写PCR 構成品& 関連製品 製品名サイズカタログ番号 バッファー M-MLV Reverse Transcriptase Buffer Pack 2 x 1 ml M5313 逆転写用プライマー Random Primers 20 μg C1181 Oligo(dT)15 Primer, 500 ug/ml 20 μg C1101 製品名サイズカタログ番号 RNase 阻害剤 RNasin® RNase Inhibitor 2,500 u N2111 10,000 u N2115 Recombinant RNasin® RNase Inhibitor 2,500 u N2511 10,000 u N2515 RNasin® Plus RNase Inhibitor 2,500 u N2611 10,000 u N2615 RNasin® Plus inhibitor によるRNaseA の阻害と RT-PCR 前の鋳型保護 鋳型RNA 1μl に対して未処理RNasin® Plus (40unit) 1μl、未処 理RNaseA(20ng) 2μl、熱処理RNasin® Plus (40unit) 1μl または 熱処理RNaseA (20ng)2 μl を図のように加えた。レーン7 で は未処理RNasin® Plus (40unit) 1μl と未処理RNaseA (20ng) 2μl を混合し、70℃、15 分間加熱した。各5μl を鋳型とし luciferase control RNA 特異的プライマー、 AccessQuick™ RTPCRSystem( カタログ番号 A1701)でRT-PCRを行った。レーン Mは200bpDNA Step Ladder(カタログ番号 G6961)。 RNasin® Plus:耐熱性・酸化耐性のあるRNase 阻害剤 RNasin® plus は哺乳類由来の組換えタンパク質であり、RNase A、B、C を阻害します。 酸化や熱に対して高い安定性を示します。RNA 精製やRT-PCR、in vitro 転写/ 翻訳 において優れたパフォーマンスを発揮する他、サンプルの長期保存にも最適です。 M 1 2 3 4 5 6 7 4099TA04_3A Unheated RNasin® Plus Heated RNasin® Plus Unheated RNase A Heated RNase A +––– –– +– +– +– – ++– +–– + – +– + +– +– • 酸化に対する抵抗性:ジスルフィド結合を形成し、アクティブサイトをブロック する2 つのシステイン残基を除去 • RNA 変性温度でもRNA を防御:RNasin® Plus とRNase の混合液を加熱してもRNase を再び活性化させない(70℃、15 分) • 改良された精製工程:可溶性タンパク質として発現するためイオン交換と疎水 クロマトグラフィーで簡単に精製でき、大腸菌RNase を含まない純度> 90% のタンパク質として精製 6 定量PCR(全てホットスタート、Fast モードに対応) 製品名構成品用途サイズ* カタログ番号 ダイベース(インターカレーション法) GoTaq® qPCR Master Mix • GoTaq® qPCR Master Mix, 2X • CXR Reference Dye • Nuclease-Free Water 定量PCR 500 回分A6001 2,500 回分A6002 GoTaq® 1-Step RT-qPCR System • GoScript™ RT Mix for 1-Step RT-qPCR • MgCl2 • GoTaq® qPCR Master Mix, 2X • CXR Reference Dye • Nuclease-Free Water 逆転写+定量PCR 500 回分A6020 GoTaq® 2-Step RT-qPCR System • GoScript™ Reverse Transcriptase • GoScript™ 5X Reaction Buffer • MgCl2 • GoTaq® qPCR Master Mix, 2X • Oligo(dT)15 Primer • PCR Nucleotide Mix • Random Primers • Recombinant RNasin® Ribonuclease Inhibitor • CXR Reference Dye • Nuclease-Free Water 逆転写+定量PCR 逆転写 50 回分 リアルタイム 500 回分 A6010 プローブベース(ハイブリダイゼーション法) GoTaq® Probe qPCR Master Mix • GoTaq® Probe qPCR Master Mix, 2X • CXR Reference Dye • Nuclease-Free Water 定量PCR 200 回分A6101 1,000 回分A6102 GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR System • GoTaq® Probe Master Mix with dUTP • GoScript™ RT Mix for 1-Step RT-qPCR • CXR Reference Dye • Nuclease-Free Water 逆転写+定量PCR 200 回分A6120 1,250 回分A6121 GoTaq® Probe 2-Step RT-qPCR System • GoScript™ Reverse Transcriptase • GoScript™ 5X Reaction Buffer • MgCl2 • GoTaq® Probe qPCR Master Mix, 2X • Oligo(dT)15 Primer • PCR Nucleotide Mix • Random Primers • Recombinant RNasin® Ribonuclease Inhibitor • CXR Reference Dye • Nuclease-Free Water 逆転写+定量PCR 逆転写 50 回分 リアルタイム 500 回分 A6110 リファレンス色素 CXR Reference Dye • CXR Reference Dye 蛍光シグナル補正100 μl C5411 * 20 μl 反応系での使用回数 GoTaq® Probe qPCR Master Mix の反応系5 μl での増幅 ヒトゲノムDNA の希釈系列を用い、384 ウェル、5 μl の反応系でTH01 を検出 した。鋳型量3.2 pg の場合、GoTaq® で増幅が見られた GoTaq® qPCR Master Mix GoTaq® Probe qPCR Master Mix 11722MA Only Promega detected 3.2pg of DD140 gDNA 50ng 10ng 2ng 0.4ng 80pg 16pg 3.2pg Promega 21.8 23.7 26.0 28.1 30.8 33.6 35.5 Vendor L 22.8 24.4 26.7 29.2 32.0 36.0 0.0 0 5 10 15 25 30 35 40 20 Cq • SYBR Green I タイプの製品と置き換え可能 より明るく高感度な蛍光物質BRYT Green® 採用 • ホットスタートタイプで室温調製可能 オートメーションシステムにも対応 • 反応系は5 μl までスケールダウン可能 • 適合プローブ: PrimeTime, TaqMan, Molecular Beacon など GoTaq® qPCR シリーズの阻害物質耐性 inhibitor Standard Curve slope intercept R2 10% Guanidium Thiocyanate -3.52 40.1 0.998 2% Ethanol -3.54 40.5 0.999 Control(no inhibitor) -3.50 40.1 0.999 RNA サンプルに各阻害物質を添加し、GAPDH のmRNA をGoTaq® 1-Step RT-qPCR System を用いて増幅した。 検量線測定では阻害物質の影響は見られず、コントロールと同様の結果を示した。 7 ダイベースとプローブベースの選択 ダイベース(インターカレーション法) プローブベース(ハイブリダイゼーション法) 増幅産物の標識dsDNA 結合色素蛍光標識プローブ コスト〇△ 機器あらゆる定量PCR 機器プローブの蛍光波長に合ったフィルターが必要 特異性全てのdsDNA を定量プローブ配列を有する増幅産物を定量 マルチプレックスー〇(異なる蛍光色素とフィルターを使用) 融解曲線解析によるQC とジェノタイピング〇ー スループット〇◎(マルチプレックスの場合) サンプル量少最少(マルチプレックスの場合) バリデーション要要 アプリケーション 遺伝子発現定量△ 〇 DNA 定量〇〇 ChIP 〇〇 SNP ジェノタイピングー〇 microRNA ー〇 コピー数解析ー〇 体細胞変異の検出ー〇 標的によるキットの選択 ゲノムDNA、cDNA GoTaq® qPCR Master Mix GoTaq® Probe qPCR Master Mix RNA GoTaq® 1-Step RT-qPCR System GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR System GoTaq® 2-Step RT-qPCR System GoTaq® Probe 2-Step RT-qPCR System ヒトgDNA の品質チェック 製品名構成品サイズカタログ番号備考 ProNex® DNA QC Assay ABI 7500/7500FAST 適合機種: ABI 7500/7500FAST • ProNex® DNA QC Dilution Buffer • 2X ProNex® DNA QC Master Mix • 20X ProNex® DNA QC Primer-Probe-IPC Mix, ABI 7500/7500FAST • ProNex® DNA QC gDNA Standard • Nuclease-Free Water 200 回分NG1002 • ヒト DNA 特異的定量 • マルチコピーターゲットで正確性を向上 • 75 bp、150 bp および300 bp を1 ウェル で同時増幅し、増幅産物量の比を断片化 指標として評価 • PCR 阻害物質存在下で起こりうる偽陰性 を検出するための内部ポジティブコント ロールを含む 800 回分NG1003 ProNex® DNA QC Assay BioRad CFX96™ 適合機種: BioRad CFX96™ • ProNex® DNA QC Dilution Buffer • 2X ProNex® DNA QC Master Mix • 20X ProNex® DNA QC Primer-Probe-IPC Mix, BioRad CFX96™ • ProNex® DNA QC gDNA Standard • Nuclease-Free Water 200 回分NG1004 800 回分NG1005 ProNex® DNA QC Assay Calibration Kit, 7500 • ProNex® DNA QC Calibration Standard, FAM • ProNex® DNA QC Calibration Standard, CFG540 • ProNex® DNA QC Calibration Standard, TAMRA • ProNex® DNA QC Calibration Standard, Q670 • ProNex® DNA QC Calibration Standard, CXR • ProNex® DNA QC Calibration Buffer 1 個NG1001 NG1002、NG1003 用 キャリブレーション試薬 1-Step と2-Step の選択 メリット • サンプル調製中の クロスコンタミネーション低減 • 数回使用したらサンプルを 捨てられる • 結果が早い デメリット • プライマーダイマーのリスク増 • cDNA を他の解析に使えない • cDNA は不要 • サンプルは使用後捨ててよい • ターゲットが1 つか数個くらい • 自動分注機を使っている こんな人は 1-step メリット • 逆転写でもPCR でも パフォーマンスを最適化できる • cDNA を他の実験に使える デメリット • 逆転写酵素とバッファーが リアルタイムPCR を阻害し得る • 簡便さが減り、より時間がかかる • 1step と比べると コンタミネーションのリスク増 • cDNA をとっておきたい • サンプルの量が限られている • 1 サンプルにつき 多くのターゲットを解析 こんな人は 2-step 8 PCR マスターミックス生産のための条件最適化キット 製品名構成品サイズカタログ番号備考 PCR Optimization Kit • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X PCR Buffer(8 種:Buffer A ~ H) • 25mM MgCl2 Solution 1 式D2381 • cGMP グレード • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase ユニット数 500 units • 各バッファー容量 1 ml 5X PCR Buffer A • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X PCR Buffer A • 25mM MgCl2 Solution 1 式D2301 5X PCR Buffer B • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X PCR Buffer B • 25mM MgCl2 Solution 1 式D2311 5X PCR Buffer C • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X PCR Buffer C • 25mM MgCl2 Solution 1 式D2321 5X PCR Buffer D • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X PCR Buffer D • 25mM MgCl2 Solution 1 式D2331 5X PCR Buffer E • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X PCR Buffer E • 25mM MgCl2 Solution 1 式D2341 5X PCR Buffer F • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X PCR Buffer F • 25mM MgCl2 Solution 1 式D2351 5X PCR Buffer G • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X PCR Buffer G • 25mM MgCl2 Solution 1 式D2361 5X PCR Buffer H • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X PCR Buffer H • 25mM MgCl2 Solution 1 式D2371 PCR Optimization Kit for Lyophilized Assays, Custom ※ 凍結乾燥PCR マスターミックス生産を目的とした 最適化キット • GoTaq® MDx Hot Start Polymerase • 5X PCR Buffer LD • 5X PCR Buffer LE • 5X PCR Buffer LI • 25mM MgCl2 Solution 1 式BX1830 PCR Optimization kit 予め調製された8 種のバッファーとMgCl2、ホットスター ト用ポリメラーゼが含まれるキットで、手持ちのプライ マーまたはプローブを用いて個々の実験に最適なPCR 条件を迅速に決定することができます。一度最適条件 が決まれば、試薬のオーダーメイドも可能です。 • 通常のPCR、マルチプレックスPCR、定量(リアルタイム)PCR、 GC リッチや阻害剤に強いPCR の最適条件の確実な検討 • cGMP グレード(cGMP については3 ページ下をご参照ください) 8 種のバッファーとMgCl2 濃度を振り、結果 の良い組み合わせを検討 2 で選んだ条件でポリメラーゼの濃度を 振り、MgCl2 濃度も微調整して完成 最適化手順 1 バッファーとMgCl2 濃度の最適化 1 で選んだ候補について、アニーリング温度 条件を振って最適条件を検討 2 アニーリング温度の最適化3 ポリメラーゼ濃度の最適化 PCR マスターミックスのオーダーメイド PCR Optimization Kit で決定した組成のマスターミックスを製造 いたします。 上記PCR バッファー8 種類のいずれかを選択し、GoTaq® MDx Hot Start Polymerase とMgCl2 の濃度をご指定ください。 • 最低受注数量は25 ml、ボトル(最大容量 25 ml)あるいは 1 ml チューブで提供 • ロット分析証明書付き • cGMP グレード • 生産日数 10 営業日以内 凍結乾燥ビーズ生産サービス PCR マスターミックス凍結乾燥ビーズの開発、パイロット生産、 製造まで、ご希望に合わせて実施します。ビーズの分注はボ トルから96 ウェルプレートまで対応いたします。 オーダーメイド、凍結乾燥を含む 診断薬・医薬品製造関連部材や サービスのガイドブックを、下記 サイトからご請求いただけます。 詳細・資料請求 www.promega.co.jp/customoem/ 9 菌/ ウイルス生死検出用クロスリンカー 製品名構成品サイズカタログ番号備考 Viability PCR Reagent System • Viability PCR Reagent(1 mM) • Viability PCR Neutralization Buffer, 10X 100 回分A8881 適合サンプル:懸濁液 Viability PCR Reagent System, High Concentration • Viability PCR Reagent(30 mM) • Viability PCR Neutralization Buffer, 10X 100 回分A8883 適合サンプル:フィルター濾過したサン プル、微生物が豊富に含まれる複雑な サンプル TruTiter™ Reagent System • Viability PCR Reagent(1 mM) • Neutralization Buffer B, 100X 200 回分A8884 ウイルスベクター/LNP の完全性を評価、 試薬処理後ダイレクトPCR 可能 Viability Direct Neutralization Buffer • Neutralization Buffer B, 100X 200 回分A8885 A8884 構成品の単品販売品 Viability PCR Reagent System Viability PCR Reagent には膜が損傷した菌(死菌)や、カプシド が損傷したウイルスのDNA およびRNA と不可逆的に結合する クロスリンカーが含まれます。 この独自の分子は結合した核酸のPCR 増幅を妨げる一方、無傷 の細胞膜やカプシドには浸透しないため、結果としてPCR 反応 のシグナルはほぼすべて生細胞または無傷のウイルスの核酸か ら生じます。このためqPCR による菌・ウイルスの生死判別が可 能となります。 • 細胞膜やカプシド不浸透性のDNA/RNA 結合分子を用い、 PCR 法において生死判別する方法 • DNase や、架橋のための光照射は不要 • 様々な細菌、ウイルスに使用可能 • ウイルスのカプシドの完全性を評価することも可能 TruTiter™ Reagent System • Viability PCR Reagent を用い、無傷のカプシド内のDNA のみをPCR で増幅して、正確なAAV ゲノム力価を測定 • カプシドの完全性評価が可能 • DNase 処理を伴う手法よりバラつきが少ない • 試薬処理後のDNA 精製ステップが不要であり、 ダイレクトにPCR が可能 • LNP のパッケージング効率測定にも使用可能 ・S. aureus ・P. aeruginosa ・E. coli ・マイコバクテリウム ・リステリア ・レジオネラ ・プロバイオティックカクテル ・ノロウイルス ・A 型肝炎 など ・AAV 使用例 細菌の生死判別 Viability PCR Reagent は膜が損傷していない生菌(紫色)には浸透しない。膜が 損傷している死菌(灰色)に浸透し※、DNA と共有結合してPCR 増幅を妨げる。 その結果、PCR シグナルは生菌からのみ観察される。 ※ウイルスの場合は損傷したカプシドに浸透 ワークフロー サンプルを試薬とインキュベートし、中和バッファーを加えた後に核酸の精製・ PCR を実施する。 DNase ベースのdigital PCR ワークフローとの比較 AAV2-NanoLuc® ウイルス カプシド(1010 GU/ml)を 65°C で 10 分間処理した後、AAV 粒 子を DNase(青)または TruTiter™ Reagent(黒)で処理し、それぞれ テクニカルレプ リケートは8 反復でdigital PCR を実施した。TruTiter™ を使用した場合、DNase ベース の手法と比較してバラつきが少なく、カプシドの崩壊を正確に検出できた。 18927MA Mix Viability PCR Reagent and sample. Incubate 60 minutes. Neutralize 15 minutes. Manual purification Automated purification PCR or 手動核酸精製 サンプルと Viability PCR Reagent を 混合 インキュベート 60 分 中和15 分 自動核酸精製 PCR or 18928MA PCR Add Viability PCR Reagent. Dead Cell Live Cell 死菌 生菌 Viability PCR Reagent 添加PCR 0 1,000 2,000 3,000 4,000 Copies Per Reaction 65°C, DNase 65°C, TruTiter 0 100 200 300 400 500 Treatment Copies Per Reaction A. B. ™ 10 レジオネラ菌DNA 検出システム(ISO 準拠)(全て室温調製可能、標準およびFast モードに対応) 製品名構成品サイズ* カタログ番号概要 レジオネラ菌検出 GoTaq® Legionella pneumophila qPCR Kit • Legionella Quant Standard • L. pneumophila IPC-Primer-Probe Mix, 20X • Legionella qPCR Master Mix, 2X • Nuclease-Free Water 200 回分AM2201 • 検出対象:レジオネラ・ニューモフィラ • qPCR によるレジオネラ・ニューモフィラの検出および 定量化について、ISO 12869:2019 に概説されている プロトコル、実験設計、および計算方法論に準拠 GoTaq® Legionella spp/ pneumophila/SG1 qPCR Kit • Legionella Quant Standard • L. pneumophila/spp/SG1 IPC-Primer-Probe Mix, 20X • Legionella qPCR Master Mix, 2X • Nuclease-Free Water 200 回分AM2202 • 検出対象:レジオネラ属菌、レジオネラ・ニューモフィ ラ、レジオネラ・ニューモフィラ血清群1 を1 度のラン で個別に検出 • qPCR によるレジオネラ属菌、レジオネラ・ニューモフィ ラ、レジオネラ・ニューモフィラ血清群1 の検出およ び定量化について、ISO 12869:2019 に概説されてい るプロトコル、実験設計、計算方法に準拠 GoTaq® Legionella pneumophila Viability qPCR Kit • Viability PCR Reagent(30 mM) • Viability PCR Neutralization Buffer, 10X • Legionella Quant Standard • L. pneumophila IPC-Primer-Probe Mix, 20X • Legionella qPCR Master Mix, 2X • Nuclease-Free Water 200 回分AM2205 • AM2201 にViability PCR Reagent System(10 ページ 掲載)が付属 • 生菌と死菌を区別したい場合にはこのキットを選択 GoTaq® Legionella spp/ pneumophila/SG1 Viability qPCR Kit • Viability PCR Reagent(30 mM) • Viability PCR Neutralization Buffer, 10X • Legionella Quant Standard • L. pneumophila/spp/SG1 IPC-Primer-Probe Mix, 20X • Legionella qPCR Master Mix, 2X • Nuclease-Free Water 200 回分AM2206 • AM2202 にViability PCR Reagent System(10 ページ掲 載)が付属 • 生菌と死菌を区別したい場合にはこのキットを選択 GoTaq® Legionella Viability qPCR Kit 給水施設などの水サンプルからレジオネラ菌を迅速かつ高感度 に検出でき、レジオネラ菌流行の早期発見・予防に役立ちます。 レジオネラ検査において、培養法の所要時間が7 ~ 10 日程度 であるのに対し、PCR 法ならはるかに高速に結果を取得できま す。一方で従来のPCR 法は生菌と死菌を区別しないため、サン プル中に残る死菌由来のDNA により偽陽性となる可能性があり ました。GoTaq® Legionella Viability qPCR Kit は、PCR の迅速さに、 死菌のDNA 増幅をブロックする分子(Viability PCR Reagent System、10 ページ)を組み合わせ、レジオネラ・ニューモフィ ラを迅速かつ高感度かつ特異的に検出します。また、レジオネ ラ属菌、レジオネラ・ニューモフィラ、レジオネラ・ニューモフィ ラ血清群1 を1 回のqPCR で区別して検出できるマルチプレック スキットも選択できます。 • 水サンプルからレジオネラ菌を数時間で高感度に検出 • 生菌だが培養できない(VBNC)レジオネラ菌も検出可能 • PCR 法でありながら生菌と死菌の区別が可能 • 培養法の結果を待つ間に、迅速にデータを取得 キットに含まれる定量スタンダードDNA 3つのターゲットからなり、PCR 阻害物質による偽陰性の有無などパフォーマンス チェックが可能。 Legionella DNA Standard mip wzm 16sRNA Legionella quantitative standard contains template for all 3 targets Legionella pneumophila-specific L. pneumophila SG1 specific Legionella genus-specific On-Filter Viability Reagent Treatment & Neutralization Optional Suspension Viability Reagent Treatment & Neutralization Automated Maxwell® RSC PureWater (AS2110) Wizard® PureWater (A3130) Sample Filtration Suspension Sample OR OR Manual 15 分 75 分 40–60 分 120 分 GoTaq® Legionella pneumophila qPCR Kit (AM2201/AM2205) GoTaq® Legionella spp/pneumophila/SG1 qPCR Kit (AM2202/AM2206) Created with BioRender.com 水サンプル準備Viability PCR Reagent 処理DNA 精製qPCR R2: 0.997 Eff: 96.2% R2: 0.998 Eff: 106.1% R2: 0.995 Eff: 105.5% 101 102 103 104 105 106 20 25 30 35 40 Genome Copies Ct Value L. spp L. pneumophila L. pneumophila SG1 マルチプレックスqPCR(AM2202 およびAM2206) レジオネラ・ニューモフィラ、レジオネラ・ニューモフィ ラ血清群1、およびレジオネラ属菌が、1 回の同じ qPCR 反応で別々に検出できる。 サンプルを濾過 自動 手動 懸濁液サンプル懸濁液のViability Reagent 処理、中和 フィルター上でViability Reagent および 中和処理 11 阻害物質耐性定量PCR(全て室温調製可能、標準およびFast モードに対応) 製品名構成品用途 逆転写 サイズ* カタログ番号 プライマーdNTP MgCl2 RNase 阻害剤 困難なサンプル用(血液、細菌ウイルス、糞便、植物、食品など) GoTaq® Endure qPCR Master Mix • GoTaq® Endure Master Mix, 2X • CXR Reference Dye • Nuclease-Free Water 定量PCR ーーーー 200 回分A6220 1000 回分A6221 GoTaq® Endure RT-qPCR System • GoScript™ Enzyme Mix • GoTaq® Endure Master Mix, 2X • CXR Reference Dye • Nuclease-Free Water 逆転写 + 定量PCR 遺伝子特異的 プライマーを 別途用意 Master Mix に 含有 Enzyme Mix に 含有 200 回分A6222 1000 回分A6223 GoTaq® Endure qPCR Direct Amp Bundle • GoTaq® Endure qPCR Master Mix • XpressAmp® Direct Ampli cation Reagents 定量PCR (ダイレクト) ーーーー200 回分A6224 GoTaq® Endure RT-qPCR Direct Amp Bundle • GoTaq® Endure RT-qPCR System • XpressAmp® Direct Ampli cation Reagents 逆転写 + 定量PCR (ダイレクト) 遺伝子特異的 プライマーを 別途用意 Master Mix に 含有 Enzyme Mix に 含有200 回分A6225 環境サンプル用(排水、環境水、土壌、空気など) GoTaq® Enviro qPCR System • GoTaq® Enviro Master Mix, 2X • CXR Reference Dye • Nuclease-Free Water 定量 PCR ーーーー 200 回分AM2000 1000 回分AM2001 GoTaq® Enviro RT-qPCR System • GoScript™ Enzyme Mix • GoTaq® Enviro Master Mix, 2X • CXR Reference Dye • Nuclease-Free Water 逆転写 + 定量 PCR 遺伝子特異的 プライマーを 別途用意 Master Mix に 含有 Enzyme Mix に 含有 200 回分AM2010 1000 回分AM2011 定量 PCR コントロールアッセイ IPC qPCR Inhibition Control Assay, CAL Fluor® 560 • IPC qPCR Inhibition Control, CAL Fluor® 560 • CXR Reference Dye qPCR 用 コントロール アッセイ ーーーー100 回分AM2030 IAC RT-qPCR Inhibition Control Assay, CAL Fluor® 560 • IAC RT-qPCR Inhibition Control, CAL Fluor® 560 • CXR Reference Dye RT-qPCR 用 コントロール アッセイ ーーーー100 回分AM2040 ダイレクト PCR 用前処理試薬(上記製品構成品の単品販売) XpressAmp™ Direct Ampli cation Reagents • XpressAmp™ Lysis Buffer • XpressAmp™ Solution • 1-Thioglycerol サンプル前処理 (ダイレクトに RT-PCR が 可能となる) ーーーー 250 回分A8882 3000 回分A8880 GoTaq® Endure/Enviro qPCR and RT-qPCR System PCR 阻害剤存在下でもターゲットを確実に増幅させるために酵素/バッファー を最適化させた、蛍光プローブ法リアルタイムPCR 用マスターミックス試薬で す。室温調製が可能なホットスタートタイプであり、ポリメラーゼ、MgCl2、 dNTP、および専用バッファーで構成されたマスターミックスであるため、反応 液の調製もスムーズです。 定量PCR コントロールアッセイ試薬(AM2030、AM2040)と組み合わせるこ とで、システムの評価も実施できます。 • 阻害剤を多く含むサンプルでもターゲット を確実に増幅 • サンプル量が多くても阻害は最小のため、 低コピーでも高感度に検出 • 高い増幅力だからマルチプレックスPCR と の相性も抜群 Δ Cq 値(IPC) 4 0 1 2 3 土壌 環境水 イヌ 糞便 他社Environmental PCR 試薬 2 μl 5 μl 4 0 1 2 3 土壌環境水イヌ 糞便 GoTaq® Enviro qPCR GoTaq® Enviro qPCR は環境サンプルに含まれる阻害物質への耐性を示す 糞便および環境由来DNA サンプルにおけるPCR 阻害の影響をインターナルポジ ティブコントロール(IPC)を用いて検証した。Δ Cq 値が0 に近いほど、阻害が 少ないことを示す。テンプレート量5 μl(20 μl 反応系)でも、GoTaq® Enviro は Δ Cq 値がほとんど変化しない高い阻害耐性を示している。 GoTaq® Endure qPCR Master Mix 他社製品 B1 R1 Q1 T1 EDTA, 4.5 mM 1.3 0.5 no Cq no Cq no Cq EtOH, 9% 1.4 2.2 no Cq no Cq no Cq Humaic Acid 332 μM 1.6 no Cq no Cq no Cq no Cq Hematin, 500 μM 0.8 no Cq no Cq no Cq no Cq Heparin, 75 U/ml 1.3 no Cq no Cq no Cq no Cq Sodium Citrate, 12 mM 2 2.2 no Cq no Cq no Cq GoTaq® Endure qPCR は、阻害物質が多く含まれるサンプルにおいても優れた パフォーマンスを発揮する 表記の濃度で阻害物質を添加した反応系において、300bp のDNA ターゲットを 増幅した。表に示した値は平均 Δ Cq 値であり、阻害物質を含む反応と含まない 反応のCq 値の差を表す。他社製品と比較して、GoTaq® Endure は変動の少ない 一貫した結果を維持した。 12 定量PCR による下水サーベイランス(全て室温調製可能、標準およびFast モードに対応) 製品名構成品検出対象内部プロセス/ 標準化コントロールサイズ* カタログ番号 インフルエンザ、 SARS-CoV-2 同時検出 GoTaq® Enviro Wastewater Flu A, Flu B, SC2 System • GoScript™ Enzyme Mix • GoTaq® Enviro Master Mix, 2X • PMMoV RNA, 4 x 106 copies/μl • FluA/FluB/SC2/PMMoV Primer Probe Mix, 20X • FluA/FluB/SC2 RNA Quant Standard • Nuclease-Free Water In uenza A、 In uenza B、 SARS-CoV-2、 PMMoV PMMoV 200 回分AM2170 SARS-CoV-2 デュアルターゲット検出 GoTaq® Enviro Wastewater SARS-CoV-2 N1/N2 System • GoScript™ Enzyme Mix • GoTaq® Enviro Master Mix, 2X • SARS-CoV-2 (N+E) RNA, 4 × 106 copies/μl • PMMoV RNA, 4 x 106 copies/μl • N1/N2 & PMMoV Primer/Probe/IAC Mix, 20X • Nuclease-Free Water SARS-CoV-2 (N1 とN2) IAC、PMMoV 200 回分AM2150 GoTaq® Enviro Wastewater SARS-CoV-2 E/N2 System • GoScript™ Enzyme Mix • GoTaq® Enviro Master Mix, 2X • SARS-CoV-2 (N+E) RNA, 4 × 106 copies/μl • PMMoV RNA, 4 x 106 copies/μl • E/N2 & PMMoV Primer/Probe/IAC Mix, 20X • Nuclease-Free Water SARS-CoV-2 (E とN2) IAC、PMMoV 200 回分AM2160 水中の病原体・糞便インジケーター GoTaq® Enviro PMMoV Quant Kit, Quasar® 670 • GoScript™ Enzyme Mix • GoTaq® Enviro Master Mix, 2X • PMMoV RNA, 4 x 106 copies/μl • PMMoV Primer/Probe Mix, Quasar® 670 • CXR Reference Dye • Nuclease-Free Water PMMoV ー100 回分AM2140 MS2 RT-qPCR Kit • 20X MS2 Primer/ Probe Mix • GoTaq® WW Master Mix • GoScript® Enzyme Mix • Quanti cation Standard RNA • Nuclease-Free Water MS2 ー100 回分CS317417 GoTaq® Enviro HF183/crAssphage Quant Kit お問合せくださいcrAssphage、 HF183 ー100 回分CS317419 その他病原菌・ウイルスの検出 GoTaq® Enviro Noro/HepA RT-qPCR System お問合せください Norovirus GI、 Norovirus GII、 Hepatitis A Virus お問合せください100 回分CS317420 GoTaq® Enviro FluA/FluB/ SARS-CoV-2/RSV お問合せください In uenza A、 In uenza B、 SARS-CoV-2、 RSV (A+B) お問合せください100 回分CS317421 GoTaq® Enviro Candida auris qPCR System お問合せくださいCandida auris FSK1、 HF183 お問合せください100 回分CS317423 定量スタンダード RNA・dsDNA PMMoV RNA • PMMoV RNA, 4 x 106 copies/μl ーー100 μl AM2070 SARS-CoV-2 (N+E) RNA • SARS-CoV-2 (N+E) RNA, 4 x 106 copies/μl ーー100 μl AM2050 SARS-CoV-2 (N+E) dsDNA • SARS-CoV-2 (N+E) dsDNA, • 2 x 106 copies/μl ーー100 μl AM2060 13 PCR・逆転写PCR・定量PCR 2025 年版 エンドポイントPCR 構成品&関連製品 3 ページ 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) バッファー 5X Green GoTaq® Reaction Buffer 20 ml M7911 12,700 5X Colorless GoTaq® Reaction Buffer 20 ml M7921 12,700 5X Green GoTaq® Flexi Reaction Buffer 20 ml M8911 13,000 5X Colorless GoTaq® Flexi Reaction Buffer 20 ml M8901 12,000 dNTP dNTP Mix, 10 mM 200 μl U1511 7,000 1000 μl U1515 15,000 dATP, 100 mM 25 μmol U1205 14,000 40 μmol U1201 20,000 200 μmol U1202 72,000 dCTP, 100 mM 25 μmol U1225 13,900 40 μmol U1221 20,000 200 μmol U1222 72,000 dGTP, 100 mM 25 μmol U1215 13,900 40 μmol U1211 20,000 200 μmol U1212 72,000 dTTP, 100 mM 25 μmol U1235 13,900 40 μmol U1231 18,000 200 μmol U1232 72,000 Set of dATP, dCTP, dGTP, dTTP (濃度各 100 mM) 各 10 μmol U1330 18,000 各 25 μmol U1420 39,000 各 40 μmol U1240 61,000 各 200 μmol U1410 210,000 dUTP, 100 mM 40 μmol U1191 22,000 Set of dUTP, dCTP, dGTP, dATP (濃度各 100 mM) 各 10 μmol U1335 22,000 各 40 μmol U1245 75,000 dNTP cGMP グレード PCR Nucleotide Mix, 10 mM 200 μl C1141 15,900 1,000 μl C1145 58,000 PCR Nucleotide Mix, 25 mM 200 μl U1431 15,900 1,000 μl U1432 54,000 MgCl2 Magnesium Chloride Solution, 25 mM 1.5 ml A3511 10,600 25 ml A3513 16,000 全製品共通関連製品 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) 水:DNase、RNase 活性フリー Nuclease-Free Water 50 ml P1193 11,000 150 ml P1195 21,000 500 ml P1197 23,000 1,000 ml P1199 26,000 エンドポイントPCR 2-3 ページ 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) スタンダード PCR GoTaq® G2 Green Master Mix 100 回分M7822 14,000 1000 回分M7823 84,000 GoTaq® G2 Colorless Master Mix 100 回分M7832 12,000 1000 回分M7833 85,000 GoTaq® G2 DNA Polymerase 100 u M7841 8,800 500 u M7845 33,000 2500 u M7848 160,000 GoTaq® G2 Flexi DNA Polymerase 100 u M7801 8,800 500 u M7805 33,000 2500 u M7806 150,000 10,000 u M7808 291,000 GoTaq® G2 Hot Start Green Master Mix 100 回分M7422 17,000 1,000 回分M7423 149,000 GoTaq® G2 Hot Start Colorless Master Mix 100 回分M7432 18,000 1,000 回分M7433 158,000 GoTaq® G2 Hot Start Polymerase 100 u M7401 14,900 500 u M7405 55,000 2,500 u M7406 156,000 10,000 u M7408 590,000 ロング PCR GoTaq® Long PCR Master Mix 100 回分M4021 79,000 ハイフィデリティー PCR Pfu DNA Polymerase 100 u M7741 25,000 500 u M7745 101,000 遺伝子診断薬グレード(cGMP グレード) GoTaq® MDx Hot Start Polymerase 100 u D6001 14,000 500 u D6005 58,000 2,500 u D6006 190,000 10,000 u D6008 710,000 GoTaq® MDx Hot Start Polymerase, Glycerol-free 500 u D6201 58,000 GoTaq® MDx Hot Start Taq Polymerase, High Concentration 1,000 u D6101 110,000 GoTaq® MDx DNA Polymerase 100 u D4001 11,000 500 u D4005 41,000 2,500 u D4006 140,000 GoTaq® MDx Polymerase, Glycerol-free 500 u D4101 41,000 価格リスト 14 逆転写 PCR 5 ページ 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) GoScript™ Reverse Transcription System 50 回分A5000 50,000 100 回分A5001 98,000 GoScript™ Reverse Transcription Mix, Oligo(dT) 50 回分A2790 48,000 100 回分A2791 65,000 GoScript™ Reverse Transcription Mix, Random Primers 50 回分A2800 50,000 100 回分A2801 65,000 GoScript™ Reverse Transcriptase 100 回分A5003 57,000 500 回分A5004 127,000 M-MLV Reverse Transcriptase 10,000 u M1701 16,000 50,000 u M1705 60,000 M-MLV Reverse Transcriptase, RNase (H-) 10,000 u M5301 33,000 M-MLV Reverse Transcriptase RNase (H-) Point Mutant 2,500 u M3681 12,000 10,000 u M3682 44,000 50,000 u M3683 167,000 Reverse Transcription System 100 回分A3500 102,000 AccessQuick™ RT-PCR System 20 回分A1701 30,000 100 回分A1702 89,000 500 回分A1703 350,000 Access RT-PCR System 20 回分A1260 27,000 100 回分A1250 86,000 500 回分A1280 330,000 AMV Reverse Transcriptase 300 u M5101 26,000 1,000 u M5108 61,000 600 u (高濃度品) M9004 43,000 逆転写 PCR 構成品 & 関連製品 6 ページ 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) バッファー M-MLV Reverse Transcriptase Buffer Pack 2 x 1 ml M5313 8,000 逆転写用プライマー Random Primers 20 μg C1181 8,600 Oligo(dT)15 Primer, 500 ug/ml 20 μg C1101 12,000 RNase 阻害剤 RNasin® RNase Inhibitor 2,500 u N2111 34,000 10,000 u N2115 72,000 Recombinant RNasin® RNase Inhibitor 2,500 u N2511 30,000 10,000 u N2515 63,000 RNasin® Plus RNase Inhibitor 2,500 u N2611 31,000 10,000 u N2615 63,000 定量 PCR 7 ページ 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) ダイベース(インターカレーション法) GoTaq® qPCR Master Mix 500 回分A6001 56,000 2,500 回分A6002 230,000 GoTaq® 1-Step RT-qPCR System 500 回分A6020 83,000 GoTaq® 2-Step RT-qPCR System 逆転写 50 回分 リアルタイム 500 回分 A6010 66,000 プローブベース(ハイブリダイゼーション法) GoTaq® Probe qPCR Master Mix 200 回分A6101 25,000 1,000 回分A6102 105,000 GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR System 200 回分A6120 75,000 1,250 回分A6121 370,000 GoTaq® Probe 2-Step RT-qPCR System 逆転写 50 回 分リアルタイ ム500 回分 A6110 51,000 リファレンス色素 CXR Reference Dye 100 μl C5411 6,200 ヒトgDNA の品質チェック 8 ページ 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) ProNex® DNA QC Assay ABI 7500/7500FAST 200 回分NG1002 210,000 800 回分NG1003 750,000 ProNex® DNA QC Assay BioRad CFX96™ 200 回分NG1004 210,000 800 回分NG1005 760,000 ProNex® DNA QC Assay Calibration Kit, 7500 1 個NG1001 55,000 PCR 条件最適化キット 9 ページ 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) PCR Optimization Kit 1 式D2381 250,000 5X PCR Buffer A 1 式D2301 69,000 5X PCR Buffer B 1 式D2311 69,000 5X PCR Buffer C 1 式D2321 69,000 5X PCR Buffer D 1 式D2331 69,000 5X PCR Buffer E 1 式D2341 69,000 5X PCR Buffer F 1 式D2351 69,000 5X PCR Buffer G 1 式D2361 69,000 5X PCR Buffer H 1 式D2371 69,000 PCR Optimization Kit for Lyophilized Assays, Custom 1 式BX1830 お問合せ 15 菌/ ウイルス生死検出用クロスリンカー 10 ページ 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) Viability PCR Reagent System 100 回分A8881 77,000 Viability PCR Reagent System, High Concentration 100 回分A8883 118,000 TruTiter™ Reagent System 200 回分A8884 98,000 Viability Direct Neutralization Buffer 200 回分A8885 49,000 レジオネラ菌DNA 検出システム 11 ページ 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) GoTaq® Legionella pneumophila qPCR Kit 200 回分AM2201 128,000 GoTaq® Legionella spp/pneumophila/ SG1 qPCR Kit 200 回分AM2202 192,000 GoTaq® Legionella pneumophila Viability qPCR Kit 200 回分AM2205 216,000 GoTaq® Legionella spp/pneumophila/ SG1 Viability qPCR Kit 200 回分AM2206 280,000 阻害物質耐性定量PCR システム 12 ページ 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) 困難なサンプル用(血液、細菌・ウイルス、糞便、植物、食品など) GoTaq® Endure qPCR Master Mix 200 回分A6220 45,000 1000 回分A6221 188,000 GoTaq® Endure RT-qPCR System 200 回分A6222 85,000 1000 回分A6223 290,000 GoTaq® Endure qPCR Direct Amp Bundle 200 回分A6224 90,000 GoTaq® Endure RT-qPCR Direct Amp Bundle 200 回分A6225 130,000 環境サンプル用(排水、環境水、土壌、空気など) GoTaq® Enviro qPCR System 200 回分AM2000 43,000 1000 回分AM2001 180,000 GoTaq® Enviro RT-qPCR System 200 回分AM2010 89,000 1000 回分AM2011 290,000 定量 PCR コントロールアッセイ IPC qPCR Inhibition Control Assay, CAL Fluor® 560 100 回分AM2030 34,000 IAC RT-qPCR Inhibition Control Assay, CAL Fluor® 560 100 回分AM2040 34,000 ダイレクト PCR 用前処理試薬 XpressAmp™ Direct Ampli cation Reagents 250 回分A8882 100,000 3000 回分A8880 1,030,000 定量PCR による下水サーベイランス 13 ページ 製品名 サイズ カタログ番号 価格( ¥) インフルエンザ、 SARS-CoV-2 同時検出 GoTaq® Enviro Wastewater Flu A, Flu B, SC2 System 200 回分AM2170 260,000 SARS-CoV-2 デュアルターゲット検出 GoTaq® Enviro Wastewater SARS-CoV-2 N1/N2 System 200 回分AM2150 250,000 GoTaq® Enviro Wastewater SARS-CoV-2 E/N2 System 200 回分AM2160 250,000 水中の病原体・糞便インジケーター GoTaq® Enviro PMMoV Quant Kit, Quasar® 670 100 回分AM2140 128,000 MS2 RT-qPCR Kit 100 回分CS317417 お問合せ GoTaq® Enviro HF183/crAssphage Quant Kit 100 回分CS317419 お問合せ その他病原菌・ウイルスの検出 GoTaq® Enviro Noro/HepA RT-qPCR System 100 回分CS317420 お問合せ GoTaq® Enviro FluA/FluB/ SARS-CoV-2/RSV 100 回分CS317421 お問合せ GoTaq® Enviro Candida auris qPCR System 100 回分CS317423 お問合せ スタンダード RNA・dsDNA PMMoV RNA 100 μl AM2070 19,000 SARS-CoV-2 (N+E) RNA 100 μl AM2050 19,000 SARS-CoV-2 (N+E) dsDNA 100 μl AM2060 19,000 テクニカルサービス ● Tel. 03-3669-7980 ● E-Mail : prometec@jp.promega.com PK2504-05B