Maxwell® 16 DNA Purification Kits Protocol

作成日： 注意： この日本語マニュアルは製品に添付される英文マニュアルを翻訳したもの ですが、常に更新されるものではありません。最新の英文マニュアルについ ては以下のサイトよりご覧ください。 Maxwell® 16 DNA Purification Kits Protocol INSTRUCTIONS FOR USE OF PRODUCTSAS1120 Quick PROTOCOL 技術的なお問合せは： e-mail: prometec@jp.promega.com・Tel: 03-3669-7980・Fax: 03-3669-7982 Revised 8/07 Maxwell® 16 DNA Purification Kitsは、Maxwell® 16 Instrument (カタログ番号 AS2000)を用いて、簡 単に効率よくゲノムDNAを精製できます。 このシステムを用いて回収したDNA量は表1のとおりになります。 表1 Maxwell® 16 Genomic DNA Purification Kitによる回収量 サンプルの種類 サイズ 標準収量 純度 (A260/A280) 全血* 200µl 6µg 1.8 400µl 11µg 1.8 バフィーコート 250µl 24µg 1.9 500µl 48µg 1.9 CHO cells 5×106 cells 11µg 1.8 HeLa cells 5×106 cells 17µg 1.8 E.coli BL21（DE3)(グラム陰性菌) 2×109 cells 26µg 2.0 B. cereus (グラム陽性菌) 2×109 cells 20µg 1.6 マウス肝臓 25mg 96µg 1.9 マウス尾 1.2cm 18µg 1.8 注意 ： このシステムを使用する際は、サンプルの種類に応じて使用するキットを選択します。 また、サンプルの性状によっては、適当な前処理が必要な場合もあります。 サンプルの種類 ： 動物組織 ・ マウス尾 使用キット ： Maxwell 16 Mouse Tail DNA Purification Kit (カタログ番号 AS1120) サンプル量 ： 最大 1.2cmまで 前処理 ： 不要 備考 ： 過剰量のサンプルでは、収量および精製度の低下につながります。また、Elution Buffer内に持ち込ま れる磁性粒子の量が増加します。 サンプル調製の注意 1本の切断したマウス尾をキットのカートリッジに加えた場合、下図のようになり、溶解されないことがま れに起こり得ます。ほとんど起こりえないことではありますが、マウス尾を2～3分割することによりリス クを回避することが可能です。 Maxwell® 16 DNA Purification Kits Protocol INSTRUCTIONS FOR USE OF PRODUCTSAS1120 Quick PROTOCOL 技術的なお問合せは： e-mail: prometec@jp.promega.com・Tel: 03-3669-7980・Fax: 03-3669-7982 Revised 8/07 手前(ドア)側 1. カートリッジの密閉シー ルをはがす。 2. それぞれのカートリッ ジのウエル番号 7 に プランジャーを挿入 し、ウエル番号 1 に サンプルを加える。 注意 ： プランジャーの向きにご注意ください。 4. Maxwell® 16 の電源を ON にする。 5. “Run” を選択して、 【Run/Stop 】ボタンを押 す。 6. “DNA” を選択して、 【Run/Stop】ボタンを押 す。 8. “DNA”と”Tissue”が選択さ れていることを確認して、 【 Run/Stop 】ボタンを押 す。 9. ドアを開けて、 【 Run/Stop 】ボタンを押 す。 10. カートリッジを Maxwell® 16 のトレイに移す。 (カートリッジは前方→後方 の順序でセットする) Elution Tube を Maxwell® 16 の elution tube slot に差 し込む。 11. 【Run/Stop】ボタンを押し、 ドアを閉める。 12. Maxwell® 16 が精製工 程を開始する。 13. 精製工程の終了後、ドアを開けて、ロッドにぶ ら下がっているプランジャーがあれば落とす。 【Run/Stop】ボタンを押す。 15. Elution Tube から溶出液を 1.5ml チューブに移し、保 存する。 7. “Tissue” を 選択して、 【Run/Stop】ボタンを押 す。 3. 青色の Elution Tube に 300µ の Elution Buffer を加える。 奥側 14. Elution Tube を Magnetic Elution Tube Rack に移 し、しばらく静置する。