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レポーターアッセイってなになになーに?

mRNA A U C G A U C G mRNA A U C G A U C G と 遺伝子はプロモーターやシグナル応答配列などの「転写調節領域」によって転写量が調節されているよ。 転写量の調節を測定することは、外からの刺激に細胞がどう反応するか調べることにもなるよ。 レポーターアッセイは、これを簡単に正確に測定できる優れた方法だよ。 こんにちは、ほたるんさんエビビンさん。 先日、指導教官から、 遺伝子 Xのプロモーター活性を、 レポーターアッセイで調べなさい、 と言われました。 レポーターアッセイって何ですか? X X X タンパク質 ふやす or へらす タンパク質 ルシ ルシ ルシ ふやす or へらす ● 数分~10 分くらいで測れるよ! ● すっごく感度が良くて、しかも簡単だよ! ● 同じやり方で、どんな種類の 転写調節領域の活性も 調べることができるよ! ルシフェラーゼが出す光を 測定するよ! ルシフェラーゼアッセイ ● 簡単な準備で様々な遺伝子 の mRNA を定量できるよ ● でも塩基配列の違いで定量 結果に差や偏りが出ること があるよ mRNA 量を測るよ! 定量 PCR なになになーに? ほたるん エビビン プロ メガ子より ● トランスフェクションしなく ていいよ ● でも検出感度は抗体の性能 によって変わってしまうよ タンパク質を測るよ! ウエスタンブロッティング レポーターアッセイって ルシフェラーゼは 光を発生する タンパク質だよ 遺伝子の産物の量を測れば 転写活性がわかるけど… レポーターアッセイは遺伝子 X のかわりに、 測定が簡単なルシフェラーゼの遺伝子を使うんだよ! Q A 転写調節領域 遺伝子 X 転写調節領域 ルシフェラーゼ遺伝子 NEXT PAGE だけど 準備が必要だよ! 遺伝子の発現がどれくらい活発かを、数値化する方法だよ! プロメガ株式会社 3 ルシフェラーゼを 光らせる試薬 4 光を測定する ルミノメーター 大事なポイントだよ 発光 と 蛍光 は違うものだよ! レポーターアッセイにはこんなものが必要だよ 細胞 2 細胞にベクターを入れるための トランスフェクション試薬 ルシフェラー 好きな ゼ 転写調節領域 を入れられるよ! シグナル応答配列入り のも売ってるよ 発光 はルミノメーター、 蛍光 はフルオロメーターで測定できるよ! RentaMAX で 試せるよ 転写調節領域と 1 ルシフェラーゼをつなげたベクター トランス フェクション www.promega.co.jp/ tech/reference.html とっても詳しい レポーターガイドも あるよ! 最新の Nano-Glo Dualだよ 特典いっぱいの プロメガクラブも よろしくね! 今ならベクターと 試薬がセットになった スターターキットが おトクだよ! NanoDLR™ スターターキット プロメガクラブ会員だけのスペシャルプライス 製品名 サイズ カタログ番号 価格(¥) Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay/pNL1.1.TK Bundle 1 セット N1521 80,000 40,000 Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay/pNL1.1.PGK Bundle 1 セット N1531 80,000 40,000 Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay/pGL4.54[luc2/TK]Bundle 1 セット N1541 80,000 40,000 Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay/pGL4.53[luc2/PGK]Bundle 1 セット N1551 80,000 40,000 プロメガ学術部による 出張セミナーも あるよ! プロメガクラブ(無料)については www.promega.co.jp/promegaclub.html をご覧ください。 テクニカルサービス ● Tel. 03-3669-7980 / Fax. 03-3669-7982 ● E-Mail : prometec@jp.promega.com PK2104-05B 販売店 日本語 Web site:www.promega.jp プロメガ株式会社 本   社 〒103-0011 東京都中央区日本橋大伝馬町14-15 マツモトビル Tel. 03-3669-7981/Fax. 03-3669-7982 大阪事務所 〒532-0011 大阪市淀川区西中島6-8-8 花原第8ビル704号室 Tel. 06-6390-7051/Fax. 06-6390-7052 ※製品の仕様、価格については2021年4月現在のものであり予告なしに変更することがあります。