細胞生存性アッセイってなになになーに？

となになになーに？ほたるんエビビン細胞生存性アッセイって Vol.4 こんにちは、ほたるんさんエビビンさん。最近先生から、プレートリーダーを使って生きた細胞数を比較しなさいって言われました。早くて簡単で気の利いた方法、何かありませんか？ Q プロメガ子よりいろいろやり方はあるけど、みんな生きた細胞だけが持っている物質や機能を測定して、どれくらいの細胞が生きているか調べるんだよ！中でも CellTiter-Glo® 2.0 みたいな「発光法」はとっても早くて簡単で、びっくりするほど感度が高いから、いろんな実験に使えるよ！ A CellTiter-Glo® 2.0がぴったりですもっと詳しく測るもの：ATP 測るもの：還元能測るもの：プロテアーゼ測るもの：還元能 CellTiter-Glo® 2.0 など CellTiter-Fluor™ など CellTiter 96® AQueous One、 MTT 法、WST 法など RealTime-Glo™ など発光法蛍光法発色法リアルタイム発光法プロテアーゼ基質測定までたった試薬をかけて細胞を一気に溶かすテトラゾリウム塩フォルマザン産物（色がついてるよ！）修飾された基質発光基質ルシフェラーゼルミノメーターで光の強さを経時的に測定するよ！吸光度計で色の濃さを測定するよ！フルオロメーターで蛍光を測定するよ！ルミノメーターで光の強さを測定するよ！還元還元 10分発色させるためインキュベーション 1～ 4 時間インキュベーション 10 分！！光るよプロテアーゼで切断されると蛍光が出る基質だよ！マルチアッセイしたい人に人気だよ！いろいろな細胞生存性アッセイのしくみルシフェリンルシフェラーゼプロメガ株式会社 CellTiter-Glo® 2.0 おすすめの理由早い簡単感度試薬はこれ1本 !! 試薬を入れて細胞溶けるそして光る測定発色するまでインキュベーション測定発色法は、細胞がいなくても少し色が出てしまうよ！これを、「バックグラウンド」って言うね！発色法みたいにバックグラウンドが高いと、少ない細胞の測定が苦手になるんだ！ CellTiter-Glo® 2.0 などの発光法はバックグラウンドがとっても低いよ！だから少ない細胞の測定もお手のものだよ！少ない細胞が得意だとできること • 貴重な細胞で実験できる！（初代細胞とか iPS 細胞とか） • アッセイをミニチュア化できる！（ハイスループットスクリーニングに最適） 1 発光法 2 蛍光法　 3 発色法 • 発光法：細胞減発光値減 • 発色法：細胞減色の濃さそれほど変わらずこれじゃあ実際よりもたくさんの細胞がいるって、カン違いしちゃうよ！何個の細胞が測れる？（目安）＊ 96 ウェル 384 ウェル発光法 50 個～ 10 個～発色法 1,000 個～ 200 個～発光法発色法 100 100% 100 個 300 個細胞数 1000 個 50 なんか多くない？測定値（ %）少ない細胞得意ランキングこれよ！このシンプルさよ！ 10 分 1〜 4 時間比べてみよう発色法だと… それだけじゃないよ！試薬を入れて10 分でピッカー！！＊細胞種や培養条件によって変わるよ！ CellTiter-Glo® 2.0は細胞が少なくても正確に測定できるよ！実験結果に影響しない？待ってる間、細胞は？生きてるよ正確例えばこんなプレートもっと教えて！ CellTiter-Glo® 2.0 黄金の3ステップ発光値 100% 10 分溶解 3 時間以上かけて半減たくさんあっても大丈夫！プロメガクラブ会員価格￥9,000 通常価格￥15,000 CellTiter-Glo® 2.0 10 ml サイズ（96 ウェルプレート 100 ウェル分）プロメガクラブに入会するとおやおや～ !? ステップ 1 ステップ 2 ステップ 3 プロメガクラブ入会 CellTiter-Glo® 2.0 お得にゲット RentaMAX でルミノメーター借りちゃおう！パターン1 パターン2 A A Q 実際に使うには何が必要？ Q どうやって保存したらいい？ Q CellTiter-Glo® 2.0を試すにあたり、1 番お得な方法を教えて！ Q 10 分経ったらすぐ測定しないとダメ？クリアボトムプレートを使う。底は透明、壁面は白なので、培養と測定の両方がこれ1 枚！培養プレート（全面透明）とソリッドプレート（全面白色不透明）の合わせ技（培養プレートで細胞培養、CellTiter-Glo® 2.0 で細胞を溶かした後、溶解液をソリッドプレートに移して測定）これなら気軽にトライできるね！ CellTiter-Glo® 2.0 プレート（白）ルミノメーター CellTiter-Glo® 2.0 ってお高いんじゃ… いつでもこのお値段 ! お安くなりますプロメガクラブ詳細は裏へ保存温度期間 4℃ 5 カ月 22 – 25℃ 7 日 85％以上の活性を保持（配送時は -20℃） 1 2 3 そんなことありません。発光値は 3 時間以上かけてゆっくり下がっていきます。多くの場合、1時間程度なら 90％ほどの発光値があります。 A 溶液状態で保存できます。 A あなただけにこっそりお教えします！すぐに使えて便利！ RentaMAX があるじゃない！プレート選びの豆知識世界基準の SBS （Society for Biomolecular Screening）規格のプレートなら、どのメーカーのでも良いよ！ルミノメーターあったかしら「あったらいいな」がきっと見つかる！ RentaMAX 機器貸出サービス　　自動核酸精製装置も、　　　　　ルミノメーターも! コンサルティング＆貸出しプログラム RentaMAX はプロメガのルミノメーター / 自動精製装置を無償で一定期間お貸出しするプログラムで、試薬 / 機器の両面からのサポート・コンサルティングも行います。プロメガオンサイトセミナー皆様のラボにプロメガ学術部員が伺い、ご希望の発光アッセイに関するセミナーを実施いたします。イベント優先ご招待弊社主催のユーザー会やセミナーなど、最新情報が手に入るイベントにご招待いたします。製品トライアル製品のトライアルサイズを無償、または特別価格でご提供いたします。 1 特典 2 特典 3 特典 4 特典大人気 ! プロメガ製品が一年中いつでも特価～対象製品まだまだ拡大中～高性能な製品が、いつでもプロメガクラブ会員価格でご購入いただけます。会員様だけに！非売品を限定販売カタログに掲載されていないキットの構成品などをご購入いただけます。現在は核酸精製用のミニカラムが単品で購入できます。細胞認証試験いつでも、いくつでも、10% OFF お手持ちのヒト培養細胞について、1 検体からでも10% OFF で細胞誤認の有無を検査いたします。データの送付だけでなく明確な判定つきなので、微妙な結果にモヤモヤしなくて済みますよ！プロメガポイントプログラムプロメガクラブ対象製品のご購入やイベント参加で、「プロメガクラブポイント」が貯まります。貯まったポイントは次年度に素敵なグッズと交換いたします。 5 特典 6 特典 7 特典 8 特典入会費・年会費はもちろん不要プロメガクラブご入会方法　　下記プロメガクラブサイトからご登録フォームに必要事項を記入し、送信してください www.promega.co.jp/promegaclub.html ＊特価製品リストはプロメガクラブサイトでご覧いただけますプロメガクラブって知ってる？登録するといろんな特典が受けられる、プロメガの無料会員サービスなの。キャンペーンなど旬な情報も、月に一度配信のメールマガジンでもれなくキャッチできるよ！プロメガクラブの8大特典ラボ活性化プログラムまだまだ拡大中！テクニカルサービス ● Tel. 03-3669-7980 ／ Fax. 03-3669-7982　● E-Mail : prometec@jp.promega.com PK1604-01B 販売店日本語 Web site：www.promega.jp プロメガ株式会社本　　　社　〒103-0011 東京都中央区日本橋大伝馬町14-15 マツモトビル Tel. 03-3669-7981／Fax. 03-3669-7982 大阪事務所　〒532-0011 大阪市淀川区西中島6-8-8 花原第8ビル704号室 Tel. 06-6390-7051／Fax. 06-6390-7052 ※製品の仕様、価格については2016年4月現在のものであり予告なしに変更することがあります。