野外トランスクリプトーム研究を支える Maxwell® RSC 自動核酸精製装置
Maxwell® RSC Instrument とキットの利用法: 野外では環境要因が複雑に変動し、それを人間が制御することはでき ません。そのため、統計的手法を駆使したデータ解析を行うために 数百から数千サンプルのデータを取得することが必要です。また、野 外で得られるサンプルは多くの場合、実験室と比べて不均質なものと なります。このようなサンプルから安定的に RNA の抽出を行うために、 我々の研究室では Maxwell® RSC Instrument を用いています。多検体を 処理するためのシステムは、マニュアルの 96 ウェルフォーマットのも のなど他にもありますが、サンプルが不均質なため 96 サンプルの準備 に時間がかかり、技術補佐員の方の勤務時間に収まらないなどの問題 がありました。 Maxwell® RSC Instrument では、一度に処理できるの は 16 サンプルですが、その分、柔軟な運用が可能で、重宝しています。 また、自動化されているため、マニュアルで抽出していたころと比べて、 失敗が減り、非常に安定した収量が得られるようになりました。 今後の展開: 野外トランスクリプトーム研究をさらに拡張していくために、さまざま な技術開発に取り組んでいます。例えばこれまでに、低コストでハイス ループットな RNA-Seq システムや、トランスクリプトームデータと気象 データとの統計モデリングのための計算ライブラリを確立してきました (Iwayama et al., (2017), Bioinformatics)。今後はこれらを活用して、野外 と実験室をつなぐ研究を進めていきたいと考えています。 temperature solar radiation 気象データ 予測 統計モデリング /機械学習 トランスクリプトームデータ データベース 理解 Nagano et al ., (2012) Cell イントロダクション: 分子生物学の多くの研究は、実験室で育てた生物を材料として行われています。しかしながら、生物は野外環境に おいて生育し、進化してきました。いうまでもなく、野外環境では複数の環境要因が同時に、かつ複雑に変化します。 これは、コントロールされたシンプルな環境である実験室とは大きく異なった環境です。そのため、実験室で取ら れたデータだけでは野外における実際の生物のふるまいを理解することは困難であり、分子生物学を現実の諸問題 解決に十分生かすことができていない原因になっています。そこで我々のグループでは、野外環境下で多数のサン プルからトランスクリプトームデータを取得し、それらのデータと気象データを合わせて統計モデリングを行うこと で、この問題に挑んでいます。例えば、水田のイネを用いた研究では、気温などの環境要因へのトランスクリプトー ムの応答を定量的に明らかにするとともに、栽培期間の任意のタイミングでのトランスクリプトームを気象データか ら予測することを可能としました(図1、Nagano et al., (2012), Cell)。 図 2. RNA-Seq ライブラリ調製の低コスト・多検体化 龍谷大学農学部 植物生命科学科 講師 永野惇先生 図 1. 野外トランスクリプトームデータと気象データのモデル化 これによって実際の野外環境下における環境応答をトランスクリプトームレベルから理解 できる。また、任意の気象条件下のトランスクリプトームの予測が可能となる。 自動化などによりRNA-Seqを 大幅に低コスト・多検体化 Cost Down ! 従来法 当研究室 Speed Up ! 従来法 当研究室 共同研究先での利用: 我々の研究室では、RNA-Seq だけでなく、WGS や GBS(ddRAD-Seq) といった様々な NGS 解析のライブラリ調製を多検体化しており、多くの研究室と 共同研究を行っています。共同研究先で対象としている生物は、植物のみならず動物、真菌、細菌など多岐にわたっており、中には核酸抽出が困難 なサンプルもしばしば含まれます。プロメガでは条件検討サービスや機器の一時的な貸し出しサービスなどがあるため、あまり分子生物学を得意と していない共同研究先にも導入を勧めやすいと感じています。実際、Maxwell® RSC Instrument は、分子生物学実験に慣れていない学生などでも NGS 解析グレードの核酸を安定的に抽出できるので、いくつかの共同研究先でも利用されるようになりました。 植物・土壌細菌など困難なサンプルの核酸抽出を無償で 検討いたします。 難しいサンプルからの核酸精製検討サービスについての詳細、お問合せは promega.formstack.com/forms/muzusample をご覧ください 野外トランスクリプトーム研究を支える Maxwell® RSC 自動核酸精製装置 関連製品 製品名 サイズ カタログ番号 価格(¥) Maxwell® RSC Instrument 1 台 AS4500 2,800,000 Maxwell® RSC Plant RNA Kit 48 回分 AS1500 39,000 難しいサンプル検討サービス開始! あなたの研究を 進める 7Promega KAWARABAN