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サクッと!細胞アッセイ !!

発光って素晴らしい! サクッと!細胞アッセイ 細胞マーカー 全40種類 発光法による細胞マーカー測定に関するオンサイトセミナーご希望の方は以下までお申込ください! プロメガのプレートリーダー所持の方はもちろん他社装置保有の方でも無償! すぐに始めたい方に朗報! 発光アッセイって素晴らしい! オンサイトセミナー受付中! 発光プレートリーダー 無償レンタル! 細胞アッセイ 発光って素晴らしい! 生死代謝応答 細胞の 状態 プレートリーダーで 紐解く 免疫原性細胞死 アポトーシス 酸化的リン酸化⬆ 細胞増殖 解糖系⬆ パイロトーシス ストレス ネクローシス 炎 症 サクッ と! プロメガ株式会社 RealTime-Glo™ Annexin V LDH-Glo™ Cytotoxicity 3D 3D 3D 3D 3D LDH CellTox™ Green CellTiter-Fluor™ 3D CellTiter-Glo® 3D 3D RealTime-Glo™ MT NADH RealTime-Glo™ Extracellular ATP 炎症 血管新生 免疫調節 抗炎症 グルカゴン ケモカイン IL-8* 多機能 IL-6 VEGF-A* IFN- ß* IFN-γ IL-2 IL-12* IL-17A* IL-18* IL-1ß TNF-α MCP* IL-4 IL-10 Caspase-Glo® 8 Lumit® Ki67 Immunoassay Caspase-Glo® 9 Caspase-Glo® 3/7 3D インシュリン* カスパーゼ-3 分解DNA ホスファチジルセリン カスパーゼ-9 カスパーゼ-8 生細胞 プロテアーゼ HMGB1 Lumit® HMGB1 ネクローシス アポトーシス 糖代謝 脂質代謝 Caspase-Glo® 1 カスパーゼ-1 Lumit® Immunoassay Series ATP Ki67* 細胞生存性 細胞増殖性 パイロトーシス ATP G6P NADP+ NAD+ NADPH αKG NAD+ NAD+ NADH NADH ADP ADP ATP ATP CO2 O2 Ac-CoA BCAA BCAA コレステロールエステル コレステロール 乳酸ピルビン酸 酸化的リン酸化 リンゴ酸 活性酸素種 (H2O2) グルタチオン グリシン シスチン シスチン グルタミン酸 ケトン体 β-ヒドロキシ 酪酸(BHB) 脂肪酸 トリグリセライド 非必須アミノ酸合成 ヌクレオチド、 タンパク質、脂質 グリコーゲン グルコース 乳酸 (分泌) 解糖系 3次元培養細胞にも対応 ペントース リン酸と その他の経路 グリセロール グルタミン グルタミン グルタミン酸 グルタミン酸 TCA回路 Glucose Uptake-Glo™ Glucose-Glo™ 3D Pyruvate-Glo™ 3D 3D Glycerol-Glo™ 3D Triglyceride-Glo™ 3D BHB-Glo™ 3D BCAA-Glo™ 3D Glucose-Glo™ NADP/ NADPH-Glo™ NAD/ NADH-Glo™ Glutamate-Glo™ and Glutamine/Glutamate-Glo™ Glutamate-Glo™ GSH/GSSG-Glo™ and GSH-Glo™ ROS-Glo™ Lactate-Glo™ Glycogen-Glo™ Pyruvate-Glo™ NAD/NADH-Glo™ Lactate-Glo™ Malate-Glo™ Triglyceride-Glo™ Glycerol-Glo™ BCAA-Glo™ BHB-Glo™ Cholesterol/Cholesterol Ester-Glo™ グルコース (取込み) アミノ酸代謝 酸化ストレス 血糖制御 3D Cholesterol/Cholesterol Ester-Glo™ 細胞の生死 Cell Fate 細胞応答 Cellular Response 細胞代謝 Cellular Metabolism 細胞マーカーを一発定量! 簡単 アッセイ サンプルに調製した試薬を添加するだけ! マルチアッセイも可能! 同じ細胞サンプルを用いて複数の細胞マーカーを測定する ことも可能です。例えば、Lumit® 発光イムノアッセイや代謝 アッセイを行った後に、細胞生存性(細胞数)を測定し、細 胞数で補正することにより、刺激に対する標的マーカーへの 直接的な影響と細胞生存性への影響を切り分けて解析する ことができます。 また、高感度な発光法なので培地を少量ずつ分注(2 μl) して培地中の複数の代謝マーカーを測定することや、さらに 細胞を溶解して細胞生存性(ATP)測定も加えて実施するこ とができます。マルチアッセイの詳細については弊社までお 問合せください。 B)ルシフェラーゼ発光反応を利用した マーカー測定原理 測定対象となる酵素や分子をルシフェラーゼ発光反応に結 び付けることで、発光検出法による高感度な測定法を確立 することができます。 生物のエネルギー源であるATP は、ホタル発光反応で消 費されるため、細胞の生存性と発光量は比例します。一方、 ルシフェリンを修飾することでプロテアーゼ活性や還元酵 素および脱水素酵素の各反応をカップリングさせたNAD (P)H 検出法により様々な代謝物や代謝酵素を発光測定す ることができます。 ※一部製品では NanoLuc® ルシフェラーゼ発光反応を利用 DIY 代謝アッセイキット! また、ラインナップに目的の代謝アッセイが無い場合、特 異的な脱水素酵素または代謝物を測定するためのDIY キッ トもございますので、詳細についてはお問合わせください。 DIY キットや受託サービスも! 特定のマーカーを測定するプレデザインキット以外 にも、オリジナルアッセイ作成のための LgBiT、 SmBiT 標識二次抗体やLgBiT、SmBiT 抗体標識 キットもあります。さらに、Lumit® アッセイ構築受託 サービスも承っております。別途お問合せください。 A)Lumit® 発光イムノアッセイ の原理 高輝度 NanoLuc® 酵素断片(LgBiT, SmBiT)で 標識した抗体を用いることにより実現した試薬を分 注するだけのイムノアッセイです。 ウェスタンブロッティングや ELISA などのイムノ アッセイと異なり、洗浄操作やブロッキングなど煩雑 な操作が不要なので、操作がシンプルで自動化やハ イスループットスクリーニングも容易です。 18420MA 発光試薬 キット内の構成品より 発光試薬を調製 発光試薬を細胞 (または培地上清) に添加 インキュベーション測光 GloMax® などの発光プレートリーダー シングルプレート法 培養細胞 測定 測定 測定測定 培養細胞 培地(2 μl) 分注法 Lumit® サイトカイン 検出試薬 (イムノアッセイ) CellTiter-Glo® 細胞生存性 測定試薬 (細胞溶解法) 細胞溶解後 ・ 代謝物アッセイ ( 例:グリコーゲン) ・ RT-qPCR (RNA精製後、 発現解析)など 代謝アッセイ (例:グルコース、 乳酸など) RealTime-Glo® 細胞生存性 測定試薬 (細胞非溶解法) 1 2 LgBiT SmBiT NanoBiT® ルシフェラーゼ 分析対象物 Lumit 抗体 エピトープエピトープ ® N S S OH N COOH N S S R N COOH ルシフェリンの測定 ATPの測定 NAD(P)H 副産物 代謝物 還元 酵素 NAD(P)+ NAD(P)+ 脱水素 酵素 タンパク質 分解酵素 発光測定用プレートリーダーについては 無償レンタルもご用意しています。 (最終ページ参照) 細胞の内外の分子マーカー(酵素、分泌タンパク質、代謝物)を精度よく測定することにより、細胞状態や細胞応答性を正確に把握することが可能です。例えば、T 細胞では、ナイーブT 細胞と エフェクターT 細胞では消費するエネルギー源が異なるため、代謝産物を測定することで細胞のステイタスを知ることができます。このように細胞状態の観察は、創薬や治療法の開発だけでなく それらの細胞医薬品の品質管理などにも利用できる可能性があります。プロメガでは試薬を加えるだけで、各種細胞マーカーを高感度に定量できる発光アッセイを多数揃えています。 * 開発中の製品です。別途お問合せください。 2 3 * ● :発光法、◆:蛍光法(発光法とのマルチアッセイに最適) プロメガクラブ会員(入会無料)の方は発光測定用プレートリーダーの無償レンタルも ご利用いただけます(詳細についてはQR コード参照)。 製品リスト 検出* 製品名サイズカタログ 番号 通常価格 (¥) 細胞生存性 ● CellTiter-Glo® 2.0 Assay 10ml G9241 18,600 ● RealTime-Glo™ MT Cell Viability Assay 100 回分G9711 25,800 ◆ CellTiter-Fluor™ Cell Viability Assay 10ml G6080 21,400 細胞毒性 ● LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay 10ml J2380 52,600 ◆ CellTox™ Green Cytotoxicity Assay 10ml G8741 20,000 アポトーシス ● RealTime-Glo™ Annexin V Apoptosis Assay 100 回分JA1000 84,000 ● Caspase-Glo® 3/7 Assay 2.5ml G8090 26,600 ● Caspase-Glo® 8 Assay 2.5ml G8200 26,600 ● Caspase-Glo® 9 Assay 2.5ml G8210 26,600 炎症 ● Caspase-Glo® 1 In ammasome Assay 10ml G9951 101,000 ● RealTime-Glo™ Extracellular ATP Assay 200 回分GA5010 41,500 ● Lumit™ HMGB1 (H/M) Immunoassay 100 回分W6110 103,300 ● Lumit™ IL-1 β( Mouse) Immunoassay 100 回分W7010 103,300 ● Lumit™ IL-1 β( Human) Immunoassay 100 回分W6010 103,300 ● Lumit™ IL-2 (Human) Immunoassay 100 回分W6020 103,300 ● Lumit™ IL-4 (Human) Immunoassay 100 回分W6060 103,300 ● Lumit™ IL-6 (Human) Immunoassay 100 回分W6030 103,300 ● Lumit™ IL-10 (Human) Immunoassay 100 回分W6070 103,300 ● Lumit™ IFN- γ( Human) Immunoassay 100 回分W6040 103,300 ● Lumit™ TNF- α( Human) Immunoassay 100 回分W6050 103,300 検出* 製品名サイズカタログ 番号 通常価格 (¥) 酸化ストレス ● ROS-Glo™ H2O2 Assay 10ml G8820 90,600 ● GSH/GSSG-Glo™ Assay 10ml V6611 118,500 ● GSH-Glo™ Glutathione Assay 10ml V6911 90,600 酸化還元(補酵素) ● NAD/NADH-Glo™ Assay 10ml G9071 117,000 ● NADP/NADPH-Glo™ Assay 10ml G9081 117,000 糖代謝 ● Glucose Uptake-Glo™ Assay 5ml J1341 83,900 ● Glucose_Glo™ Assay 5ml J6021 85,800 ● Lactate-Glo™ Assay 5ml J5021 95,200 ● Glycogen-Glo™ Assay 5ml J5051 101,000 ● Lumit™ Glucagon Immunoassay 100-400 回分W8020 138,000 脂質代謝 ● Glycerol-Glo™ Assay 5ml J3150 93,700 ● Triglyceride-Glo™ Assay 5ml J3160 114,000 ● Cholesterol/Cholesterol Ester-Glo™ Assay 5ml J3190 114,000 ● BHB-Glo™(Ketone Body) Assay 5ml JE9500 95,000 アミノ酸代謝 ● Glutamate-Glo™ Assay 5ml J7021 95,300 ● Glutamine/Glutamate-Glo™ Assay 5ml J8021 102,000 ● BCAA-Glo™ Assay 5ml JE9300 95,000 ミトコンドリア機能 ● Pyruvate-Glo™ Assay 5ml J4051 95,000 ● Malate-Glo™ Assay 5ml JE9100 95,000 発光プレートリーダー 無償レンタル 生死代謝応答 テクニカルサービス ● Tel. 03-3669-7980 ● E-Mail : prometec@jp.promega.com PK2410-06B