Dualってなになになーに?
と レポーターアッセイはトランスフェクション効率の良し悪しで見た目の値が増減しちゃうから、 じつは再現性の有無は見た目の数値だけじゃわからないんだよ! Dual レポーターアッセイは実験レポーターと一緒に「内部標準レポーター」もトランスフェクションして、 トランスフェクション効率の影響を補正する方法だ!補正すれば真の姿が見える! こんにちは、ほたるんさんエビビンさん。 ルシフェラーゼで レポーターアッセイはじめました! でも同じ実験なのに再現性がありません。 指導教官から「Dualレポーターにすべきだよ」と 言われましたが、Dual レポーターって何ですか? 200 の方は、 トランスフェクションで いっぱいレポーターが 入っただけなんだね! なになになーに? ほたるん エビビン プロ メガ子より Dualレポーターって Q A見た目の数値 実は… 正解:どっちも同じぐらいビッカビカ レポーターを2つ使って、実験のバラつきを補正する方法だよ! Vol.7 エビビン 発光値 100 ほたるん 発光値 10,000 vs ほたるんの方が光ってる? 真の姿 一匹あたりの 発光値 10 vs 100 実はそう 思ってた! 200 100 ほたるんは 1000 匹いた。 エビビンが 10 倍光ってた! ではここで問題です! 発光値 200 と100 のサンプル、 ビッカビカに光ってるのはどっち? 200 に きまってるじゃん! ゴクリ 細胞 実験レポーター 内部標準レポーター 一緒にトランスフェクション 実 内 200 200 100 100 200 200 100 100 実 実 内 内 発光値 =1 200 200 =1 100 100 実 内 割り算で 補正すると 同じ 見た目はそうだね! だけど内部標準を使うとどうなるかな? … プロメガ株式会社 イチオシキットは Nano-Glo Dual! 細胞 トランス フェクション 細胞を溶かし、 内部標準レポーターを 光らせる試薬 実験レポーターを 測定 光らせる試薬を追加 測定 実験 レポーター ルシフェラーゼ 内部標準 レポーター ルシフェラーゼ 大丈夫 !! 試薬を 次々加えていくだけだから とっても簡単なんだ! 連続測定ができる Dualアッセイキット 製品名 サイズ カタログ番号 感度 多検体 スターターセット Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay System 10 ml N1610 あり Dual-Glo® Luciferase Assay System 10 ml E2920 なし Dual-Luciferase® Reporter Assay System 100 回分 E1910 なし 各キットはサイズ違いもあります。 内部標準で補正 できるのはわかった! 今までのレポーターアッセイより やることが増えそうだけど、 私でもできるかな? 実 内 実 内 内 連続測定 というよ!! これを使えば 実験精度 爆上げだね! 試薬と 内部標準の セット 発光値が 高いよ! たくさんあっても 大丈夫! + 超高感度な 最新製品だから ! 理 由 1 発光半減期が長いから (約 2 時間)! 理 由 2 スターターセットが プロメガクラブで半額 理 由 3 プロメガクラブ 実 内 テクニカルサービス ● Tel. 03-3669-7980 / Fax. 03-3669-7982 ● E-Mail : prometec@jp.promega.com PK2105-02B 販売店 日本語 Web site:www.promega.jp プロメガ株式会社 本 社 〒103-0011 東京都中央区日本橋大伝馬町14-15マツモトビル Tel. 03-3669-7981/Fax. 03-3669-7982 大阪事務所 〒532-0011 大阪市淀川区西中島6-8-8花原第8ビル704号室 Tel. 06-6390-7051/Fax. 06-6390-7052 ※製品の仕様、価格については2021年5月現在のものであり予告なしに変更することがあります。