Maxwell® RSC Blood DNA Kit

pg. 1 技術的なお問合せは： e-mail: prometec@jp.promega.com・Tel: 03-3669-7980・Fax: 03-3669-7982 Maxwell® RSC Blood DNA Kit (カタログ番号 AS1400) 簡易マニュアル ご用意いただくもの • ボルテックスミキサー • ピペットマン (P-200、P-1000)とそれらのチップ • 56℃にセットしたヒーティングブロック • 1.5ml遠心チューブ 血液からのDNA抽出の手順 EDTA, ACD, ヘパリンのいずれの採血管もご利用いただけます。 ただし、抽出したDNAを以降の実験にご利用になる場合、EDTA採血管を推奨します。 1. 血液サンプルを少なくとも5分間、室温で撹拌する(ローテーターなど利用する)。 2. 1.5ml遠心チューブに、30μlのProteinase Kを加える。 3. 最大300μlまでの血液サンプルを加える。 4. 300μlのLysis Bufferを加える。 5. 10秒間のボルテックスにより十分に撹拌する。 6. 56℃に設定したヒーティングブロックに、サンプル/試薬を加えた1.5ml遠心チューブをセットし、 20分間インキュベーションを行う。この間に、次の『カートリッジの準備』を行う。 pg. 2 技術的なお問合せは： e-mail: prometec@jp.promega.com・Tel: 03-3669-7980・Fax: 03-3669-7982 カートリッジの準備 1. 検体数分のカートリッジをMaxwell® RSC/CSC Deck Trayに立て、順にアルミシールを剥がす。 カートリッジの両端がカチッというまで、しっかりとセットする 注意：サンプル数が16より少ない場合には、Maxwell® RSC/CSC Deck Trayの中央部分をお使いく ださい。 2. 同数のElution Tubeをセットし、50μlのElution Bufferを加える。 Elution Bufferは30～100μlを加えることができます。ただ し、30μの場合、磁性ビーズの持ち込みの割合が高くなること が予想されるため、標準として50μl Elution Bufferでの溶 出をお勧めします。 Elution Tubeのフタは絶対に閉めないでください。 3. カートリッジのウエル8に、プランジャーを置く。 4. 56℃のインキュベーションが完了したサンプル全量を、カートリッジのウェル1に添加する。 ウェル1は最も大きなウエルです。カートリッジラベルに一番近く、Elution tubeからは最も遠い位 置にあります。 5. Maxwell RSC Instrumentを起動し、Startから『Blood DNA／AS1400』を選択する。 6. Maxwell® RSC/CSC Deck Trayを、Maxwell® RSC本体にセットし、精製操作をスタートす る。 精製終了後の操作 1. Maxwell RSC® Instrumentのドアを開け、Elution Tubeのフタを閉める。 2. Maxwell® RSC/CSC Deck Trayを取り出し、Elution Tubeを適切に保管する。 3. Maxwell RSC® Instrumentのドアを閉める。カートリッジとプランジャーを廃棄する。