Wizard® SV 96 Plasmid DNA Purification System

Revised 4/01 Part #9FB023J TECHNICAL INFORMATION: www.promega.co.jp • Tel 03-3669-7980 • Fax 03-3669-7982 Wizard® SV 96 Plasmid DNA Purification System INSTRUCTIONS FOR USE OF PRODUCTS A2250, A2255 AND A2291. Quick PROTOCOL2651MB04_1A Lysate Clearing Plate Binding Plate Elution Plate 1昼夜培養液 ● 遠心 ● 再懸濁 ● 溶解/中和 ライセートを移す ライセートの清澄化 DNAの補足 洗浄 溶出 高純度 プラスミドDNA. クリアーライセートの調製とDNAの結合 1. 1,500 x g、15分間の遠心で集菌 2. 各ペレットをCell Resuspension Solution 250µl で懸濁 3. 1ウェルあたりCell Lysis Solution 250µlを加え、タッピングにより混和。 オプション: 1ウェルあたりAlkaline Protease Solution 10µlを加え、混和 後、3分間インキュベート。 4. 1ウェルあたりNeutralization Solution 350µl加え、混和。 5. サンプルをマニホールド上のLysate Clearing Plate に移し、吸引。液体 がLysate Clearing Plateを通過したら吸引を停止し、Clearing Plateを取 り外す。 6. DNA Binding Plateに 1ウェルあたりNeutralization Solution 500µlを添 加。 7. 吸引を1 分間行った後、吸引停止。 洗浄 8. DNA Binding Plate 1ウェルあたりWash Solution 1.0ml(エタノールを加 えたもの)を添加し、1分間吸引。 9. 吸引停止後、ステップ 8同様に洗浄。2回目の洗浄後は10分間吸引。 10. 吸引を停止した後、吸引ホースをManifold Collarに繋ぎ換える。 溶出 11. Elution PlateをManifold Bedの上に設置し、 Manifold Collarを上に乗せ る。 12. DNA Binding Plateをcollarの上に置き、1ウェルあたりwater 100µl を添 加。1分間静置後、1分間吸引。 13. 吸引停止後、Binding Plateおよびcollarを取り外す。Elution Plateをplate sealerで覆った後、そのDNAは4℃または-20℃ で保存。 Lysate Clearing Plate Manifold Base Manifold Base Manifold Bed Manifold Collar DNA Binding Plate Elution Plate Pins for Manifold Collar alignment Manifold Collar DNA Binding Plate A. Lysate Clearing and DNA Binding Apparatus B. Washing Apparatus C. Elution Apparatus DNA Binding Plate Vacuum Port with Insert in place Additional protocol information is available in Technical Bulletin #TB272, available upon request from Promega or online at www.promega.com