NanoLuc® Luciferase Technology
NanoLuc® Luciferase Technology
アプリケーション
| 技術 | 実験手法 | 内容 |
|---|---|---|
| NanoLuc® ルシフェラーゼ | NanoBRET® | タンパク質間相互作用検出（生細胞リアルタイムアッセイ） |
| ターゲットエンゲージメント | 分子とタンパク質の相互作用を生細胞リアルタイムモニタリング | |
| バイオセンサー | 細胞内外のシグナリングイベントをBRETベースのバイオセンサーで検出 | |
| イメージング | 細胞または動物個体でのイメージング | |
| タンパク質の安定性 | 細胞内タンパク質の存在量の変動をモニタリング | |
| 遺伝子制御 | 感度が格段にアップしたレポーターアッセイ | |
| 発現確認 | PAGE後、NanoLuc® 融合タンパク質のバンドを簡便に可視化 | |
| 2分子相補システム | NanoBiT® | タンパク質間相互作用検出（生細胞リアルタイムアッセイ） |
| HiBiT細胞内タンパク質検出 | 細胞内で発現したHiBiT融合タンパク質の定量（細胞を溶解する） | |
| HiBiT細胞外タンパク質検出 | 細胞膜上に存在、または分泌されたHiBiT融合タンパク質の定量（細胞を生かしたまま測定） | |
| HiBiTブロッティング検出 | ウエスタンのようにメンブレンにブロットしたHiBiT融合タンパク質を検出（抗体不要） |
NanoBRET® とNanoBiT® の特性比較
| 特性 | NanoBRET® | NanoBiT® | |
|---|---|---|---|
| 方式 | 生物発光共鳴 エネルギー転移（BRET） | 発光酵素断片の相補性 | |
| 検出対象 | 近接度 | 直接的な相互作用 | |
| タグの大きさ | 小さい 20 kDa（NanoLuc™）と30 kDa（HaloTag®） |
非常に小さい 11アミノ酸（SmBiT）と<18 kDa（LgBiT） |
|
| データ | 2波長の比率（低 %CV） | RLU（相対発光強度） | |
| 試薬添加回数 | 2 | 1 | |
| 検出機器 | アッセイ | BRET 対応ルミノメーター （適合フィルター要） |
ルミノメーター （フィルター不要） |
| イメージング | 発光イメージングシステム （Olympus LV200 など）： 相互作用前後を観察可能 |
発光イメージングシステム （Olympus LV200 など）： 複合体のみ観察可能 |
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| 可逆性 （キネティックアッセイ可） |
◯ | ◯ | |
| 製品形態 | キット（100種類以上）、 クローニングベクター、検出試薬 |
クローニングベクター、 検出試薬 |
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| NanoBRET® ベクター構築サービス | NanoBiT® ベクター構築サービス | ||
| ライセンス費用（企業を含む） | 試薬の購入のみ | ||
| その他 | HaloTag® 側を使ったプルダウン | ||