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P450-Glo™ Assay System

ミクロソーム画分のCYP450の活性は測定できますか？

ミクロソーム画分のCYP450の活性を測定することもできます。弊社で確認しているサンプルは、ヒトとラットの肝ミクロソーム画分、およびCYP450発現昆虫細胞ミクロソームです。
ミクロソーム画分から測定する場合、タンパク量（サンプル量）20μgをお薦めします。
①ミクロソーム画分を調製または購入し、マニュアルに従って反応液を調製する。室温または37℃で30分間インキュベーションする。
②サンプルと等量のLuciferin Detection Reagentを加えて20分間室温に静置後、ルミノメーターで測定する。

<肝ミクロソーム画分の調製法>
ラットの肝臓を切取し、肝重量を測定した後、1.15% KCl溶液で洗い、血液成分を除去します。その後0.1Mリン酸緩衝液を肝重量の3倍として加えホモジネートし、9,000 x g、20分間冷却遠心後、上清をさらに105,000 x gで60分間超遠心分離することにより、ミクロソーム画分が得られます。