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PCR基本情報

どの耐熱性DNA polymeraseが非鋳型依存的に3’末端にAを付加しますか。

3´→5´ exonuclease活性を欠いた耐熱性DNA Polymeraseは鋳型に依存せずにヌクレオチド（通常はdATP）を増幅産物の3’末端に付加します。このような酵素には、Taq DNA Polymerase、Tfl DNA Polymerase、Tth DNA Polymeraseが含まれます (表 1)。polymeraseが3´→5´ exonuclease proofreading活性を持つ場合、 この活性によって鋳型に依存しないヌクレオチドは除かれ、平滑末端を有する産物となります。これらの酵素にはTli DNA Polymerase、Pfu DNA Polymeraseなどが含まれます。（PN71-Q&A)

表1．耐熱性DNAポリメラーゼの特徴

特徴	Taq DNA Polymerase	Tfl DNA Polymerase	Tth DNA Polymerase	Tli DNA Polymerase	Pfu DNA Polymerase
由来	Thermus Aquaticus	Thermus flavis	Thermus thermophilus HB-8	Thermococcus litoralis	Pyrococcus furiosus
分子量	94kDa	94kDa	94kDa	90kDa	92kDa
半減期（95℃）	40分	40分	20分	400分	※
伸長率（nt/sec. @72℃）	60～150	※※	25	67	※
逆転写活性	低レベル	低レベル	〇 （Mn2+依存性）	×	※
サイクル半減期	50サイクル	50サイクル	25サイクル	500サイクル	※
3'Aの付加	〇	〇	〇	×	×
5'→3' エクソヌクレアーゼ活性	〇	〇	〇	×	×
3→'5' エクソヌクレアーゼ活性	×	×	×	〇	〇
※データー無　　※※解析中