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LDH-Glo（発光検出）

LDH-Gloの使用方法を教えてください。

下記のような手順で使用します。

１．LDH Detection Enzyme MixとLactate Dehydrogenaseを室温で溶解、室温に戻します。

２．使用直前にLDH Detection Reagentを調製する（下表）。

Component	1 Assay	1 Plate (96-well)
LDH Detection Enzyme Mix	50 µL	5 mL
Reductase Substrate	0.25 µL	25 µL

３．LDH Detection Reagentを5回、転倒攪拌する。

４．LDH Storage Bufferに希釈済みのサンプルを、室温にもどす。白色プレートに50 uLづつ分注する。

５．50 µL LDH Detection Reagentを各ウェルに加える。

６．室温で30-60分置く。

７．発光測定を行う。

【細胞毒性（％）計算例】

培地のみのサンプルをブランクとして差し引き、LDHの活性とします。細胞毒性は次のようにして求めます。

細胞毒性 (%)=(実験サンプル－ブランク）／（最大LDH放出量－ブランク）× 100

・培地のみのサンプルが必要です。

・最大LDH放出サンプルとして、0.2% Triton-X 100処理した細胞などをご用意ください。

詳しくは製品プロトコール（TM548）をご参照ください。