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Wizard® Genomic DNA Purification Kit

Wizard® Genomic DNA Purification Kitでは一定時間あたりの処理量をどのように上げますか?

Wizard^® Genomic DNA Purification Kitは20μl～10mlの血液サンプルからのゲノムDNA抽出に適用できます(1)。一般的に96ウェルプレートでは1ウェルあたり20～50μlの血液を処理できます。チューブを用いた場合には50μl～10mlの処理を行えます。96ウェルプレートで少量(20～50μl)の血液を処理する場合、一定時間あたりの処理量を増やし、実際の作業時間を短縮できます。少量の血液からでもPCRによる増幅に十分な量のDNAを回収することができます。しかし、Southern blot, dot/slot blotsや制限酵素消化には十分量ではないかもしれません。サンプルに含まれる白血球数に依存しますが、一般的に50μlの血液から0.2～0.7μgのDNAを回収することができます。

少量(20～50μl)の血液サンプルに対応した96ウェルプレートのプロトコールを使う場合、DNAは各ウェルの底面に沈殿します。大量のサンプルはチューブを使って処理できます。1.0ml以下の血液から抽出されるゲノムDNAを製品に添付されるDNA Rehydration Solutionで室温で、20分間溶かすと、4℃で一晩溶かした量に対して約50%が再溶解されます。いずれの方法でもPCRに適したDNAが得られます。(eNotes-FAQ0009)

参考文献:

1. Koller, S., Shiels, G. and Bitner, R. (1999) Using the Wizard^® Genomic DNA Purification Kit with 96 Well Plates. Promega Notes 73, 20.