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レポーターアッセイ＆シグナリング
- トランスフェクション
- 遺伝子レポーター
- タンパク質レポーター
- 細胞内シグナリング
- 機器
トランスフェクション試薬
ViaFect™ Transfection Reagent ・ FuGENE® 6 Transfection Reagent ・ FuGENE® HD Transfection Reagent
- ViaFect, FuGENE 6とFuGENE HDトランスフェクション試薬の主な違いは何ですか？
- 試薬の保存方法について教えてください。
- DNAと試薬は、どの比率で混合する場合が最も導入効率が良いですか?
- 遺伝子を多く導入したい場合には？
- 遺伝子導入試薬添加後に培地交換する必要はありますか？
- 96wellプレート以外ではどのくらいの液量を添加しますか?
- どんな細胞での実施例がありますか?
- FuGENE HDトランスフェクション試薬を使用した幾つかのプロトコールを紹介してください。
MultiFectam
- 試薬の保存期間（凍結乾燥品/溶解後）について教えてください。
- DNAと試薬は、どの比率で混合する場合が最も導入効率が良いですか?
- 遺伝子導入試薬添加後に培地交換する必要はありますか？
- 血清を含む培地を使ってもよいとありますが、無血清培地を使うとさらに導入効果は高まりますか？
- DNAを溶解する溶液として20mM Tris-HClが推奨されていますがTE（Tris/EDTA）では可能ですか?
- siRNAをTEもしくは滅菌水で溶解して使用することは可能ですか?
- DNA、MultiFectamの複合体調製時にOPTI-MEMR培地の替わりにPBSが使えますか?
- 遺伝子を多く導入したい場合には？
- 24wellプレート以外では何回分の導入が可能ですか?
- どんな細胞での実施例がありますか?
細胞選択
Antibiotic G418 Sulfate Solution
レポーターアッセイ一般
レポーターアッセイ基本情報
- プロメガのレポーター酵素の安定性、分子量、基質、および感度はどのようになっていますか。
- ３つのルシフェラーゼの発光波長はどのくらいですか？
- なぜプロモーターエレメントを解析するときに、2つの異なるレポーターベクターがトランスフェクション実験に使われるのですか。
- 測定機器は何を使えばよいでしょうか？
- ルシフェラーゼの発光測定に適したプレートやチューブは何ですか？
発光レポーターベクター ＆ 細胞株
pGL4 Luciferase Reporter Vectors
- pNL/pGL4 Vectorの特徴を教えてください。
- pGL4.10[luc2] VectorはpGL3-Basic Vectorと比較して、どのような特徴があるのですか？
- ホタルルシフェラーゼ遺伝子をもつpGL4 .1シリーズのベクターはどのように使い分けるのですか？
- pGL4.10[luc2] Vectorに挿入した配列のシークエンスを確認したいのですが、どのレポーターベクター用プライマーが使用できますか？
- ホタルルシフェラーゼ発現に対する内部標準に使用するにはどのベクターが良いのでしょうか?
- ルシフェラーゼにタンパク質分解配列のCL1やPESTを融合させていますが、分解配列を持たないルシフェラーゼと比べて、どのような特徴を示しますか？
- どのような原理で応答性が上がるのですか？
- 他のレポーターに比べて、Rapid Response Reporter Vectorsの発現量と半減期はどのようになっていますか？
- pGL4.7 Vectors はpRL Vectors、phRL Vectorsと比較して、どのような特徴があるのですか？
- ウミシイタケルシフェラーゼ遺伝子をコードするpGL4 .7シリーズのベクターはどのように使い分けるのですか？
- minPとは、何ですか？
- minPが導入されたベクターはどのようなアッセイに利用されますか？
- minPの由来は何ですか？
- minP導入済みベクターpGL4シリーズは、どのような製品がありますか？
- 現在販売されているpGL4ベクター（転写因子応答配列＋minP）以外に今後販売する予定はありますか？
- minPを用いる利点は何ですか？
pNL Vector
- pNL Vectorの特徴を教えてください
- 分泌型アッセイのメリットは何ですか？
- pNL ベクターはpGL4ベクターとどのように違うのですか？
- 配列情報を教えてください
- いろいろなベクターがあるようですが、どのように使い分けたらいいですか？
- minPとは、何ですか？
- 転写因子応答配列導入済みのNanoLucレポーターベクターはありますか？
GloResponse™ Luciferase Reporter Cell Lines
- GloResponse™ Luciferase Reporter Cell Linesとは何ですか？
- GloResponse™ にはどのような製品がありますか？
- 安定発現株を自作するのと比較して、GloResponse™ を使うことの利点は何ですか？
- GloResponse™の培養条件を教えてください。
- コントロールになる薬剤はありますか？
- GloResponse™ を注文する際の注意点を教えてください。
NanoLuc™ アッセイ（シングル・デュアル）
NanoLuc®
- NanoLuc™の由来は何ですか？
- NanoLuc™は他のルシフェラーゼと比べ、どのくらい明るいのですか？
- NanoLuc™の細胞内での安定性に関するデータはありますか？
- NanoLuc™は哺乳動物細胞以外でも使えますか？
- NanoLuc™の抗体はありますか？
- NanoLuc™と任意のタンパク質を融合させて使用することは可能ですか？
Nano-Glo® Luciferase Assay System
- 保存条件を教えてください
- 発光波長を教えてください
- Nano-Glo®の発光半減期はどの程度ですか？
- 細胞ライセートを作ってアッセイできますか？
- Nano-Glo®はデュアルレポーター方式に対応していますか？
- 細胞イメージングなどでNanoLuc基質を使用する方法を教えてください。
- NanoLuc®基質 furimazineおよびin vivo用の基質は販売していますか？
Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay (NanoDLR™)
- NanoDLR™ は従来のDual-Luciferase® Assay System、Dual-Glo™と何が違いますか？
- 従来のDual製品との発光値比較データはありますか？
- NanoDLR™ はどのようなアプリケーションに使用できますか？
- レポーターベクターの選び方を教えて下さい
- 細胞ライセートを作ってアッセイできますか？
- 保存条件を教えて下さい
- ONE-Glo™EX Luciferase Assay ReagentとONE-Glo™Luciferase Assay System（E6110など）の違いはなんですか
- Coincidence レポーターとはなんですか？
- ウミシイタケ（Rluc）ベクターは使えますか？
- インジェクターを使用する際の注意点はありますか？
ホタルアッセイ（シングル・デュアル）
Bright-Glo™ Luciferase Assay System・ Steady-Glo® Luciferase Assay System ・ ONE-Glo™ Luciferase Assay System
Dual-Glo™ Luciferase Assay System・Dual-Luciferase® Reporter Assay System
- ウミシイタケルシフェラーゼの活性は、ホタルルシフェラーゼの活性とどのような違いがありますか? また、２つのレポーターベクターの共トランスフェクションにはどのような条件が推奨されますか。
- レポータートランスフェクションの結果を標準化することは、なぜ必要なのですか？また、どのような内部標準ベクターを使うのが最も良いですか？
- Dual-Liciferase® Reporter Assay SystemとDual-Glo™ Luciferase Assay Systemの違いは何ですか？
- ホタルルシフェラーゼとウミシイタケルシフェラーゼの発光半減期はどの程度ですか？
- 未開封での保存期間はどのくらいですか？ また、調製後の試薬、Luciferase Assay Reagent II(Luciferase Assay Substrate＋Luciferase Assay Buffer II)とStop & Glo® Reagent (Stop & Glo® Substrate＋Stop & Glo® Buffer) の保存期間はどのくらいですか？
- Luciferase Assay Buffer IIとStop & Glo® Bufferを室温で溶解させた時、析出物が見られますが、問題ありませんか？
- Luciferase Assay Reagent IIのかわりに、ホタルルシフェラーゼ定量システムLuciferase Assay System (カタログ番号：E1500) のLuciferase Assay Reagentを使ってDual-Luciferase® Assayはできますか？
- ホタルルシフェラーゼとウミシイタケルシフェラーゼの発光値にばらつきが見られます。原因として何が考えられますか？
- ルシフェラーゼ活性は、刺激後どのくらいの時期から測定できますか？
- シングルチューブタイプのルミノメーターを使用しています。ホタルルシフェラーゼ活性を測定して、その後ウミシイタケルシフェラーゼ活性を測定することは可能ですか？
- 保存期間はどのくらいですか？
- Dual-Glo™ Luciferase BufferとDual-Glo™ Stop &Glo® Bufferに析出が見られますが、問題ありませんか？
- 96ウェルプレート以外で細胞を培養した場合、どのように測定すればよいですか？
- 細胞を凍結保存して後日アッセイできますか？
- 添加した刺激物質を除いてから測定したいのですが、培地を捨てて、細胞に直接Dual-Glo™ Luciferase Reagentを加えることは可能ですか？
- Dual-Glo™ Luciferase Assay Systemの推奨する発光測定時間はどのくらいですか？
細胞溶解剤
細胞溶解剤基本情報（CCLR・RLB・PLB・GLB)
- プロメガのルシフェラーゼ試験で使用される細胞溶解剤の種類とそれらの違いは何ですか？
- プロメガの細胞溶解剤では、どのようなレポーターアッセイやタンパク質測定法に適応していますか？
- プロメガのルシフェラーゼ試験で使用される細胞溶解剤にホスファターゼやプロテアーゼの阻害剤は含まれていますか？
ウミシイタケアッセイ（ライブセル）
EnduRen™ Live Cell Substrate
- EnduRen™ Live Cell Substrateは、レニラルシフェラーゼの一般的な基質であるセレンテラジンとどのように異なりますか?
- ホタルルシフェラーゼの基質ルシフェリンも生細胞アッセイに使用できますが、それと比較してEnduren™ の利点は何ですか？
- EnduRen™ Live Cell Substrateはどのようなアッセイに使えますか？
GFPレポーターベクター
Monster Green® Fluorescent Protein phMGFP Vector
- Monster Green Fluorescent Protein phMGFP Vector の特長は何ですか？
- Monster Green™ Fluorescent Proteinは他の一般的なGFPとどのように異なりますか?
- Monster Green™ Fluorescent Proteinとの融合タンパク質を作成することはできますか?
- phMGFP Vectorで安定的な発現細胞株を作製することは可能でしょうか?
- in vitro 発現系でMonster Green™ Fluorescent Proteinを使用することはできますか？
β-ガラクトシダーゼアッセイ
β-Galactosidase Enzyme Assay System
Beta-Glo® Assay System
- Beta-Glo® Assay Systemはどのような試薬ですか?
- Beta-Glo® Assay Systemの特長は何ですか?
- Beta-Glo® Assay Systemの保存条件と溶解後の保存期間について教えてください。
- Beta-Glo® Assay Systemで得られる発光はどのぐらい安定ですか?
- Beta-Glo® Assay Systemの測定で推奨するプレートは何ですか?
- ホタルルシフェラーゼを発現する細胞に、Beta-Glo® Assay Systemを使用することはできますか？
- Beta-Glo® Assay Systemで使用可能な培地の種類を教えてください。
- 培地中のフェノールレッドの影響はありますか? また、アッセイに影響する要因として注意する点はありますか?
- Beta-Glo® Assay Systemは酵母でのアッセイに利用できますか?
タンパク質検出
Lumit Immunoassays
HiBiT
- HiBiT塩基配列を人工合成、ペプチド合成してもよいですか？
- HiBiTのアミノ酸配列は？
- HiBiTベクターの配列情報およびベクターマップはどこで入手できますか？
- HiBiTベクターはN末端付加用、C末端付加用がありますが、どのように選択すればよいですか？
- HiBiTと目的タンパクの間にリンカーは必要ですか？またその長さを検討する必要はありますか？
- ORF内部にHiBiTを挿入してもワークしますか？
- 分泌型の融合ベクターはどのような時に使用しますか？
- ゲノム編集に応用するためには何を準備すればよいですか？
- 論文実績はありますか？
- HiBiTとLgBiTの結合はどのくらい強いですか？
- NanoBiTのSmBiTとHiBiTの違いは何ですか？
- 動物細胞以外 (植物、菌、酵母など) でも使用できますか？
- ブロッティングの検出感度は一般的なタグとくらべて高いですか？
- HiBiT検出のポジティブコントロールはありますか？
- LgBiT 発現ベクターの単品販売はありますか？
- 一般的な蛍光顕微鏡でイメージングできますか？
- 検出にはどのような機器が必要ですか？
- HiBiTのサブクローニング受託はしていますか？
- HiBiT 抗体はありますか？
タンパク質間相互作用分析（PPI 分析）
NanoBiT™
- 試薬の保存条件を教えて下さい
- ネガティブコントロールの設定はどのようにすればよいのか
- NanoBRET™との違いを教えて下さい
- NanoBRET™との使い分けは？
- Ｎ末端、C末端また、LgBiTとSmBiTの配向について、組み合わせの最適化は必要ですか？
- 遺伝子導入量の比率を調整する必要はありますか？
- SmBiTとLgBiTには親和性がありますか？
- 高親和性のNanoBiT™の取り扱いはありますか？
- NanoBiT™にNanoGloの基質は使用できないか
- 内部標準は必要ですか？
- リンカー配列の最適化は必要か、どれくらいのサイズ差まで対応できますか？
- 一般的な蛍光顕微鏡でイメージングできますか？
- 経時的な長時間のアッセイをすることは可能ですか？
- 測定に使用できる機器は？
- 測定に使用できるプレートは？
- 安定発現株でアッセイできますか？
- 阻害剤や化合物を添加してからどれくらいの時間から測定できますか？
- 哺乳動物細胞以外での応用は可能ですか？
- in vivoで使用できますか？
- LgBiTとSmBiTの会合を阻害する条件や化合物はありますか？
- どのような細胞で実績がありますか？
NanoBRET™
- 試薬の保存条件を教えて下さい
- 内部標準は必要ですか？
- NanoBiTとの違いを教えて下さい
- NanoBiTとの使い分けは？
- Ｎ末端、C末端また、NanoLucとHaloTagの配向について、組み合わせの最適化は必要ですか？
- NanoBRET™用リガンド以外のHaloTagリガンドは使用できますか？
- シグナル持続時間は？
- スクリーニングに使えますか？
- 標的タンパク質が結合していないのにBRETが起こることはありますか？
- リンカー配列の最適化は必要ですか？
- BRETシグナルが標的タンパク質の結合に特異的であることはどのように確認でますか？
- 普通の蛍光顕微鏡でイメージングできますか？
- 測定に使える機器は?
- 測定に使えるプレートは？
- 安定発現株でアッセイできますか？
- 哺乳動物細胞以外での応用は可能ですか？
- in vivoで使用できますか？
- どのような細胞で実績がありますか？
cAMP測定 （細胞内センサー）
GloSensor™ cAMP Assay
- GloSensor™ cAMP Assayはどのようなアッセイですか？
- プラスミドがpGloSensor™-20FとpGloSensor™-22Fの2種類ありますが、何が違いますか？
- 細胞内のcAMPの絶対量を測定することはできますか？
- GloSensor™ cAMPバイオセンサーを一過性に発現させてアッセイすることはできますか？
- デュアルルシフェラーゼアッセイのように内部標準コントロールが必要ですか？
- GloSensor™ cAMP Assayの測定機器や測定容器はどのようなものがお薦めですか？
- 顕微鏡で観察することはできますか？
- アッセイ温度は室温と37℃のどちらがよいのでしょうか？
- GloSensor™ cAMP Reagentを加えて2時間平衡化する操作はなぜ必要なのですか？
- どのような細胞種に使用できますか？
- 哺乳動物細胞以外の生物種にも使えますか？
- cGMPを検出する恐れはないのですか？
- 同じサンプルなのに実験日ごとの発光値のばらつきが大きいのですが、何が問題でしょうか？
- 細胞の種類を変えたら発光値やForskolinに対する応答性が大きく異なりました。なぜですか？
- 発光値を上げることはできますか？
- マニュアルのデータは、刺激してから15～30分後に発光値を測定していますが、このタイミングでは発光ピークを過ぎているのではありませんか？発光ピークを過ぎてから測定するのはなぜですか？
- Gi共役型受容体のアッセイを行う場合、Forskolinを添加する必要はありますか？またForskolinを添加した場合としない場合でEC50が異なることはありますか？
- ホスホジエステラーゼ阻害剤を添加する必要はありますか？
- GloSensor™ cAMP バイオセンサーの発現量を確認する方法はありますか？
- ルシフェラーゼ発光にはルシフェリン以外にもATPやMg²+が必要ですが、これらは細胞内にあるもので十分なのですか？ライブセルアッセイでこれらが律速になってしまう可能性はありますか？
- cAMP結合部位に改変を加え、cAMP以外のものの細胞内測定に使用することは可能ですか？
- 細胞を溶解してアッセイすることや、細胞外に放出されたcAMPの検出に使えますか？
抗リン酸化タンパク質抗体
Anti-ACTIVE®MAPK, JNK
キナーゼ阻害剤
MEK Inhibitor U0126
キナーゼアッセイ
ADP-Glo
- 測定原理を教えてください。
- ADP-Glo™とADP-Glo™ Maxは何が異なりますか？
- 今までのキナーゼアッセイと比較してどのような特徴がありますか？
- ADP-Glo™で測定できるキナーゼにはどのようなものがありますか？
- キナーゼ以外の酵素にも使えますか？
- ADP-Glo™ Reagentを添加する前に、キナーゼ反応を停止しておく必要はありますか？
- 検出できるADP濃度の範囲を教えてください。
- 反応液に添加できるATP濃度の上限を教えてください。
- 試薬の保存条件を教えてください。
- 推奨する反応条件はありますか？
- ADP濃度とRLU値の相関性を調べるためにはどうすればよいですか？
- ステップ1、残存ATP分解反応のインキュベーション時間を変更することができますか？
- ステップ2、ADP変換反応のインキュベーション時間を変更することができますか？
- キナーゼ反応を37℃で行う必要があります。ADP-Glo™ Reagent添加後は室温で反応するように指示がありますが、キナーゼ反応直後にADP-Glo™ Reagentを添加することはできますか？
- 塩、有機溶媒、界面活性剤などはアッセイに影響しますか？
- 反応液のATP濃度を上げるとバックグラウンドが高くなります。原因は何ですか？また解決方法はありますか？
- 同じサンプルでアッセイを行った場合でも測定値がばらついてしまいます。どのような点に気をつければよいのでしょうか？
- 384 または1536-well plateを使用したHigh Throughput Screeningは可能ですか？
- シングルチューブタイプのルミノメーターでも測定できますか？
- 培養細胞抽出液中の酵素活性を測定できますか？
- Kinase Detection Bufferに溶け残りがある場合にはどうしたらよいでしょうか?
- ADPスタンダードが全く光りません。何が原因ですか？
- Kinase Enzyme System (KES)とは何ですか？
- キナーゼリストにない酵素も買えますか？今後酵素が増える予定はありますか？
- Kinase Selectivity Profiling Systemsとは何ですか？ Kinase Enzyme Systemとは何が異なりますか？
- カタログ品と異なる組合せの酵素ストリップは買えますか？
Kinase-Glo®
- 測定原理を教えてください。
- 今までのキナーゼアッセイと比較してどのような特徴がありますか？
- Kinase-Glo® 、KiGlonase-® Plus、Kinase-Glo® Maxの違いを教えてください。
- ATP濃度とRLU値の相関性を調べるためにはどうすればよいですか？
- Kinase-Glo® で測定できるキナーゼにはどのようなものがありますか？
- 同じサンプルでアッセイを行った場合でも測定値がばらついてしまいます。どのような点に気をつければよいのでしょうか？
- Kinase-Glo® 試薬を添加する前に、キナーゼ反応を停止しておく必要はありますか?
- IC50の算出方法を教えてください。
- 384 well plateを使用したHigh Throughput Screeningは可能ですか？
- 培養細胞抽出液中のキナーゼ活性を測定できますか？
- Kinase Detection Bufferに溶け残りがある場合にはどうしたらよいでしょうか?
ルミノメーター
GloMax Discover/Explorer/Navigator
GloMax™ 96 & GloMax™ 20/20ｎ 基本情報
- GloMax™ 96 Microplate Luminometer (以下、GloMax™ 96 )とGloMax™ 20/20ｎ Luminometer （以下、GloMax™ 20/20ｎ）の違いは何ですか?
- どのような検出器を使用していますか？
- 発光量はどのような単位で表されますか。
- 測定時間を長くすることで、より微小な発光の検出が可能になりますか？
- 何本のインジェクターを搭載できますか？
- 内蔵型インジェクターは、外付け型インジェクターに対してどのような利点がありますか？
GloMax® 20/20 Luminometer
- 従来のTD-20/20とどのように異なりますか？
- 測定するときに常にインジェクターは必要でしょうか？
- 電源を入れた後に、ウォームアップのための時間が必要ですか？
- 操作のためにコンピューターは必要でしょうか？
- 測定にはどのくらいの量のサンプルをテストチューブに入れる必要がありますか？
- Spreadsheet Interface Softwareを利用するために、コンピューターにはどのようなシステムが必要ですか？
- Spreadsheet Interface SoftwareはMachitoshでも使えますか？
- 感度はどのくらいですか？
- どれくらいのダイナミックレンジを示しますか？
- GloMax™ 20/20ｎで時間経過に伴う連続的な発光量の変動を測定することはできますか？
- GloMax™ 20/20のインジェクターの分注液量はどのくらいですか？
- GloMax™ 20/20ｎ Fluorescent Moduleとはどのような製品ですか？
- GloMax™ 20/20ｎ Light Standardとはどのような製品ですか？
- GloMax 20/20に接続が可能なパソコン・スペックが知りたい。
- GloMax® 20/20 から測定結果の出力は可能ですか？