MagneGST™ Protein Purification System ・ MagneGST™ Pull-Down System
- MagneGST™とはどのような製品ですか？ また、どのようなサンプルから精製に利用することができますか？
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MagneGST™ Protein Purification System(以下MagneGST™)は、大腸菌あるいはin vitro翻訳反応後で発現させたグルタチオン-S-トランスフェラーゼ (GST) 融合タンパク質(以下、GST-Tagタンパク質)を簡単、迅速、安定に精製するためのシステムです。MagneGST™ の精製プロトコルの概要を図1に示します。
磁性体粒子であるMagneGST™ Glutathione Particlesは、GST-Tagタンパク質と相互作用します（1）。続いて、マグネットスタンドを用いて、GST-Tagタンパク質がMagneGST™ Glutathione Particlesに結合した状態で洗浄操作を行い（2）、Elution Buffer (10mM Glutathioneとなるように調製する)でGST-Tagタンパク質を溶出させます（3）。
図1 MagneGST™ Protein Purification SystemによるGST-Tagタンパク質結合の原理と
精製プロトコルの概要MagneGST™を用いたGST-Tagタンパク質の精製には、大腸菌培養液から効率的なライセートサンプルの調製が必要になります。プロメガでは、OD600nmの吸光値と大腸菌培養液1mL～50mLまでのスケールに合わせて適切なMagneGST™ Cell Lysis ReagentとMagneGST™ Glutathione Particlesを添加することを勧めます（表1）。
表1 大腸菌培養液量に対して推奨するMagneGST™ Cell Lysis Regaentと添加量
大腸菌培養液量 MagneGST™ Cell Lysis
Reagent添加量MagneGST™ Glutathione
Particles添加量OD600=2.0 OD600=6.0 1 mL 200 µL 600 µL 100 µL 5 mL 1 mL 3 mL 500 µL 10 mL 2 mL 6 mL 1 mL 50 mL 10 mL 30 mL 5 mL
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