• Q&Aトップ
• プロテオミクス
• 哺乳動物細胞発現_哺乳動物発現制御
• Regulated Mammalian Expression System

Regulated Mammalian Expression System

細胞に導入するプラスミド量を検討する必要がありますか？

使用する細胞種によって、誘導前の発現量が異なるため、導入するプラスミドの総量と二つのベクターの最適な量比を検討する必要があります。プロメガではHela, COS-7, HEK293細胞について検討しました（図5）。Hela, COS-7細胞では、12ウェルプレートの1ウェル当たり10⁶個の細胞にpF12A RM Flexi^® Vectorを0.1µg、pReg neo Vectorを0.4µgを導入した条件で、誘導前の発現はほぼ完全に抑制されました。HEK293細胞では、同条件で誘導前の発現が約10倍と高くなりましたが、導入するプラスミドの量を1/10にすることで誘導前の発現を抑えられ、100倍近い誘導効率が得られました。