レポーターアッセイ基本情報
- プロメガのレポーター酵素の安定性、分子量、基質、および感度はどのようになっていますか。
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プロメガのホタルルシフェラーゼ、ウミシイタケルシフェラーゼ、β-ガラクトシダーゼおよびクロラムフェニコール・アセチルトランスフェラーゼ(CAT)酵素の安定性、分子量、基質、および感度のデータを以下の表に示します。
表 レポーター酵素の安定性・分子量・基質・感度
レポーター酵素 mRNA
半減期タンパク質
半減期分子量 基質 感度 NanoLuc
ルシフェラーゼ19kDa
単量体フリマジン 10-22moles
(0.01 fg)ホタル
ルシフェラーゼ6時間
(1)3時間
(哺乳類)(1,2)61kDa
単量体(3)甲虫ルシフェリン
(1,6)10-20moles
(1 fg)ウミシイタケ
ルシフェラーゼ- 5.3時間
(40℃)(2)36kDa
単量体(2,4,5)セレンテラジン
(2,5,8)3X10-19moles
(10 fg)β-ガラクトシダーゼ - 20時間 465kDa 4量体
(各116kDa)(6)ONPG(2,6) 104~105moles CAT 6時間(1) 50時間(1) 80kDa 4量体
(各20kDa)(7)クロラムフェニコール
(6)5~10X107moles 参考資料:
1. Thompson, J.F. et al. (1991) Gene 103, 171.
2. Bronstein, I. et al. (1994) Anal, Biochem. 219, 169
3. Luciferase Assay System Technical Bulletin #TB101, Promega Corporation.
4. Matthews, J.C. et al. (1977) Biochemistry 16, 85
5. Lorenz, W.W. et al. (1993) In : Bioluminescence and Chemiluminescence John Wiley and Sons, 191.
6. Alam, J. and Cook, J.L. (1990) Anal. Biochem. 188, 245
7. Shaw, V.W. et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88, 4438.
8. Lorenz, W.W. et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88, 4438
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