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E. coli S30 Extract System

プロメガのE. coli S30 Extract Systemはどのような製品ですか？また、複数の製品がありますが、それぞれどのような特徴がありますか？

E. coli S30 Extract Systemは、大腸菌無細胞翻訳システムです。製品としては3種類あり、それぞれの特徴は表1のとおりです。

E. coli S30 System for Circular DNAは、転写・翻訳に必要な成分(S30 Extract)とアミノ酸ミックス以外のrNTPs、tRNA、ATP再生系システム、IPTGそして適切な塩濃度を含んでいるS30 Premixを使用します。in vitroで翻訳させるためには、鋳型にE. coliの strong promoterであるlac、tacなどのプロモーター配列が必要になります。

E. coli S30 System for Linear Templateは、E. coli S30 System for Circular DNAで使用するS30 Extractを修飾することで、直鎖DNAを鋳型にしたときでも転写・翻訳反応を行うことができます。また、RNAを鋳型にした翻訳反応のみにも使用できます。

E. coli T7 S30 System for Circular DNAは、E. coli S30 System for Circular DNAで使用するS30 Extractを修飾することでT7 promoterの配列をもつ環状DNAを鋳型としても使用できます。直鎖DNA、RNAは鋳型として使用できません。

＜参考＞

S30とは、supernatant-30,000g(30,000xgで遠心後に得られた上清液)の略です。

表1　E. coli S30 Extract Systemの比較

製品名	鋳型			プロモーター	収量*	コントロール ベクター
	環状 DNA	直鎖状 DNA	RNA
E. coli S30 System for Circular DNA	○	×	×	strong E. coli	100～250ng	pBESTluc™ Vector Circular (1ug/uL)
E. coli S30 System for Linear Template	○	○	○	strong E. coli	100～250ng	pBESTluc™ Vector Linear (0.5ug/uL)
E. coli T7 S30 System for Circular DNA	○	×	×	T7 プロモーター, strong E. coli	300ng	PinPoint™ Control Vector DNA Circular (1ug/uL)

*：1回の反応量を50uLとして算出しています。