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GloSensor™ cAMP Assay
- GloSensor™ cAMP Assayはどのようなアッセイですか?
- プラスミドがpGloSensor™-20FとpGloSensor™-22Fの2種類ありますが、何が違いますか?
- 細胞内のcAMPの絶対量を測定することはできますか?
- GloSensor™ cAMPバイオセンサーを一過性に発現させてアッセイすることはできますか?
- デュアルルシフェラーゼアッセイのように内部標準コントロールが必要ですか?
- GloSensor™ cAMP Assayの測定機器や測定容器はどのようなものがお薦めですか?
- 顕微鏡で観察することはできますか?
- アッセイ温度は室温と37℃のどちらがよいのでしょうか?
- GloSensor™ cAMP Reagentを加えて2時間平衡化する操作はなぜ必要なのですか?
- どのような細胞種に使用できますか?
- 哺乳動物細胞以外の生物種にも使えますか?
- cGMPを検出する恐れはないのですか?
- 同じサンプルなのに実験日ごとの発光値のばらつきが大きいのですが、何が問題でしょうか?
- 細胞の種類を変えたら発光値やForskolinに対する応答性が大きく異なりました。なぜですか?
- 発光値を上げることはできますか?
- マニュアルのデータは、刺激してから15~30分後に発光値を測定していますが、このタイミングでは発光ピークを過ぎているのではありませんか?発光ピークを過ぎてから測定するのはなぜですか?
- Gi共役型受容体のアッセイを行う場合、Forskolinを添加する必要はありますか?またForskolinを添加した場合としない場合でEC50が異なることはありますか?
- ホスホジエステラーゼ阻害剤を添加する必要はありますか?
- GloSensor™ cAMP バイオセンサーの発現量を確認する方法はありますか?
- ルシフェラーゼ発光にはルシフェリン以外にもATPやMg²+が必要ですが、これらは細胞内にあるもので十分なのですか?ライブセルアッセイでこれらが律速になってしまう可能性はありますか?
- cAMP結合部位に改変を加え、cAMP以外のものの細胞内測定に使用することは可能ですか?
- 細胞を溶解してアッセイすることや、細胞外に放出されたcAMPの検出に使えますか?