Kinase-Glo®

Kinase-Glo® 、KiGlonase-® Plus、Kinase-Glo® Maxの違いを教えてください。

Kinase-Glo® は10µM ATPまで、Kinase-Glo® Plusは100µM ATPまで、そしてKinase-Glo® Maxは500µM ATPまでの直線性を有します（図2参照）。Kinase-Glo® PlusとKinase-Glo® MaxはATPに対して高いKm値を有するキナーゼの測定やATP結合サイトで競合しないキナーゼ阻害剤のスクリーニングなどに適しています。

一方、測定範囲内ではKinase-Glo® PlusよりKinase-Glo® 、Kinase-Glo® MaxよりKinase-Glo® Plusの方が高い発光値を得られます。この差は特にKinase-Glo® PlusとKinase-Glo® Maxで顕著なため、100µM ATPまででアッセイする場合はKinase-Glo® Plusをお薦めします。

図2　Kinase-Glo® 、Kinase-Glo® Plus、Kinase-Glo® MaxのATP濃度とRLU値の相関性

50μl kinase reaction buffer (40mM Tris [pH 7.5], 20mM MgCl2, 0.1 mg/ml BSA)にrATPを希釈し、 Kinase-Glo® (A) 、Kinase-Glo® Plus (B) もしくはKinase-Glo® Max(C) 試薬を添加10分後にルミノメーターで測定

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