NanoBRET™
- NanoBiTとの使い分けは?
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こちらをご参照ください。
このような場合、NanoBRET or NanoBiT? 実験条件 推奨手法 理由 Peptide - Protein binding NanoBiT™ NanoBRET™の場合、Peptideに NanoLuc(19KDa) あるいはHaloTag(32KDa)を標識するとpeptideの活性に影響が出る可能性 低親和性 (想定Kd >10μM) NanoBRET™ SmBit: LgBitの親和性が190μM であり、標的タンパク間の親和性が低いと、SmBiT:LgBiTの親和性が関与してしまう 分注再現性(ばらつき)に自信がない NanoBRET™ ratio metric なので、ばらつきが補正される High Throughput NanoBiT™ 発光試薬の添加ステップがBitは1回、BRETは2回、測定もBiTは1回、BRETは2回 単純なLuminometer しかない NanoBiT™ チューブルミノメーターでも可能(浮遊細胞に限る) Imagingで観察したい NanoBiT™ NanoLuc の 1/3の輝度を確保。NanoBRETは、BRETによる転移効率等により輝度が期待できない上、最適なフィルターが必要。
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